PCR法直接筛选重组阳性克隆

摘要

目的建立一个简便、可靠的重组阳性克隆的筛选方法.方法应用扩增小鼠生精细胞凋亡相关基因时使用的引物,以基因重组扩增后得到的菌落为模板,直接进行PCR扩增.结果在筛选的阳性菌落中可扩增到与小鼠凋亡相关基因片段大小一致的阳性条带;以阳性克隆提取质粒进一步进行PCR和酶切鉴定及序列分析,证明结果正确.结论菌落PCR是一种简便、快速、可靠、有效的筛选重组阳性克隆的方法.