夜蛾颗粒体病毒宿主筛选及其增殖因子主次研究

摘要

夜蛾颗粒体病毒(GXW9-3 Mamestra oleracea granulosis virus)简称MOGV GXW9-3。该病毒2013年首次由高小文在江苏镇江发现,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCCNO:V201340,样品呈黑色粉末状,保存于4℃冰箱。MOGV GXW9-3是寄生在鳞翅目夜蛾科昆虫真皮、脂肪组织及血细胞中的一种最重要的杆状病原病毒,以蛋白质包涵体的形式存在,蛋白质包含着一个病毒颗粒,核酸为双链DNA。本文研究影响MOGV GXW9-3增殖宿主及增殖因子的主次,筛选该病毒增殖最佳宿主及其增殖因子主次。研究结果表明,影响MOGV GXW9-3产量的因子及互作因子主次顺序为:宿主细胞 > 饲毒虫日龄与收毒时间互作 > 饲毒虫日龄与收毒时间互作 > 收毒时间 > 温度。明确饲毒宿主,饲毒虫日龄因子对病毒产量有极显著影响,饲毒虫日龄和饲毒虫日龄与收毒时间存在互作且对产量有显著影响。确定MOGV GXW9-3增殖宿主为斜纹夜蛾细胞,最佳生产条件为26~28℃、分别按药剂浓度为:6 × 106 GV/mL、4 × 106 GV/mL、3 × 106 GV/mL、2.4 × 106 GV/mL、2 × 106 GV/mL的剂量饲毒斜纹夜蛾6龄幼虫,14~16 d后提取病毒,斜纹夜蛾6龄幼虫平均单虫个体重约1.046 g,冷冻干燥后每头虫体重量约为:0.085~0.108 g,平均单虫病毒产量约为0.069~0.28亿GV/g,幼虫孵化到收集幼虫提取病毒的生产周期为24 d,病毒增殖倍数为:31.25~43.75倍。