苍耳SRAP-PCR体系优化设计方案比较

摘要

采用正交设计和均匀设计对苍耳SRAP-PCR反应体系进行优化,并对2种设计方案优化出的最佳反应体系的可靠性和稳定性进行比较,结果表明:2种设计均可用于苍耳SRAP-PCR体系的优化,但与正交设计相比较,均匀设计可以使试验次数大大减少,避免盲目性,在多因素多水平条件下,快速得到条带清晰、稳定性好的最优SRAP-PCR体系.通过试验比较筛选出苍耳的SRAP-PCR最佳反应体系为:2.5 μL 10×PCR buffer,30 ng模板DNA,Mg2+ 2.5 mmol/L,dNTP 1.5 mmol/L,引物0.3 μmol/L,Taq DNA聚合酶1U,总体积25 μL.