人参黑斑病菌RAPD反应体系的优化

摘要

采用改良的CTAB法提取人参黑斑病菌的基因组DNA,建立人参黑斑病菌RAPD反应的体系.最佳体系容积为25 μL,其中包括10×Taq配套缓冲液2.5 μL,模板DNA 20 ng/μL,引物15 pmol/L,dNTP 150 μmol/L,Taq DNA聚合酶1 U,Mg2+1.5 mmol/L,其余部分用DW补充.PCR扩增程序为:94 ℃预变性5 min,94 ℃变性1 min,40 ℃退火1 min,72 ℃延伸2 min,40次循环,72 ℃延伸7 min.