电针联合骨髓间充质干细胞移植通过调节SDF-1/CXCR4轴促进薄型子宫内膜修复的机制研究

摘要

目的:观察电针联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对薄型子宫内膜形态、子宫内膜组织基质细胞衍生因子-1(SDF-1)/CXC趋化因子受体4(CXCR4)轴相关蛋白及mRNA的影响,探讨其修复薄型子宫内膜的机制。方法:将健康SPF级性成熟雌性SD大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、BMSCs组、BMSCs+AMD3100组、BMSCs+电针组(联合组)、联合+AMD3100组,每组5只。除空白组外,其余5组采用95%乙醇宫腔注射的方法于大鼠动情期制备薄型子宫内膜模型。BMSCs组于造模第1、3、7天给予尾静脉注射BMSCs。BMSCs+AMD3100组在BMSCs组的基础上,以5mg/kg的剂量给予腹腔注射AMD3100,每日1次;联合组在BMSCs组的基础上取“子宫”“关元”“三阴交”,每日给予电针刺激15 min;联合+AMD3100组在联合组干预基础上,以5 mg/kg的剂量给予腹腔注射AMD3100,每日1次。以上3组均干预3个动情周期。通过HE染色法观察大鼠子宫内膜形态,免疫组织化学法检测子宫内膜组织波形蛋白、角蛋白19的表达,Western blot法检测子宫内膜组织同源框(HOXA)10、白血病抑制因子(LIF)、SDF-1和CXCR4的蛋白表达水平,实时荧光定量PCR法检测大鼠子宫内膜组织SDF-1和CXCR4 mRNA的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠子宫内膜腺体数目及子宫内膜组织波形蛋白、角蛋白19的阳性表达均减少(P<0.01),HOXA10、LIF、CXCR4蛋白及CXCR4mRNA表达水平均降低(P<0.01),SDF-1蛋白及mRNA表达水平均升高(P<0.05)。与模型组比较,BMSCs组和联合组大鼠子宫内膜腺体数目及子宫内膜组织中波形蛋白、角蛋白19的阳性表达增多(P<0.05,P<0.01),HOXA10、LIF、CXCR4蛋白及CXCR4mRNA表达水平均升高(P<0.01,P<0.05);联合组SDF-1蛋白及mRNA表达水平升高(P<0.05)。与BMSCs组比较,联合组子宫内膜腺体数目增多(P<0.01),LIF、CXCR4蛋白及CXCR4 mRNA表达水平均升高(P<0.01,P<0.05);BMSCs+AMD3100组子宫内膜腺体数目及子宫内膜组织中波形蛋白、角蛋白19的阳性表达减少(P<0.01),HOXA10、LIF、CXCR4蛋白及mRNA表达水平降低(P<0.01)。与联合组比较,联合+AMD3100组大鼠子宫内膜腺体数目及子宫内膜组织波形蛋白、角蛋白19阳性表达均减少(P<0.01),HOXA10、LIF、CXCR4蛋白及CXCR4 mRNA表达水平均降低(P<0.01)。结论:电针可增强与干细胞归巢相关的SDF-1和CXCR4信号分子的表达,促进移植的BMSCs向受损部位转移,从而促进薄型子宫内膜再生,修复子宫内膜损伤,改善子宫内膜容受性。