隔药饼灸激活Nrf2/ARE/HO-1信号通路修复阿司匹林诱导的胃黏膜损伤的机制研究

摘要

目的:探讨隔药饼灸是否通过激活核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路修复阿司匹林诱导的胃黏膜损伤。方法:SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、隔药饼灸穴位组、空白+抑制剂组、模型+抑制剂组、隔药饼灸+抑制剂组,每组20只。阿司匹林(150 mg/kg)灌胃诱导复制胃黏膜损伤模型。隔药饼灸穴位组和隔药饼灸+抑制剂组施隔药饼灸“足三里”“中脘”“脾俞”“胃俞”,每次30 min,连续治疗8 d。3个抑制剂组的大鼠腹腔内注射HO-1抑制剂锌原卟啉5 mg/kg。观察各组大鼠外观行为变化并进行评分;观察胃黏膜损伤程度并对胃黏膜损伤指数进行评定;HE染色观察胃黏膜组织形态学变化;ELISA法检测胃黏膜组织、血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。荧光定量PCR法和Western blot法检测胃黏膜组织中Nrf2/ARE/HO-1信号通路相关因子Keap1、Nrf2、HO-1、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)、NAD(P)H醌脱氢酶1(NQO1) mRNA和蛋白表达水平。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠的行为状态、情绪反应、皮肤毛发、饮食状态和大便状态评分升高(P<0.01),胃黏膜炎性反应明显,胃黏膜损伤指数升高(P<0.01),胃黏膜组织和血清中SOD活性降低(P<0.01),MDA含量升高(P<0.01),胃黏膜组织中Keap1 mRNA和蛋白表达上调(P<0.01),Nrf2、HO-1、CAT、GST、NQO1 mRNA和蛋白表达下调(P<0.01)。与模型组比较,隔药饼灸穴位组大鼠的情绪反应、皮肤毛发和大便状态评分降低(P<0.01,P<0.05),胃黏膜损伤指数降低(P<0.01),胃黏膜炎性反应减轻,胃黏膜组织和血清中SOD活性升高(P<0.01),MDA含量降低(P<0.01),Keap1 mRNA和蛋白表达下调(P<0.01),Nrf2、HO-1、CAT、GST、NQO1 mRNA和蛋白表达上调(P<0.05,P<0.01)。隔药饼灸+抑制剂组大鼠使用HO-1抑制剂后,与隔药饼灸穴位组比较,皮肤毛发评分升高(P<0.01),胃黏膜损伤指数升高(P<0.05),胃黏膜炎性反应加重,胃黏膜组织和血清中SOD活性降低(P<0.01),MDA含量升高(P<0.01),Keap1 mRNA和蛋白表达上调(P<0.05),HO-1、CAT、GST、NQO1 mRNA和蛋白表达下调(P<0.05,P<0.01),Nrf2蛋白表达下调(P<0.05)。结论:隔药饼灸可通过激活Nrf2/ARE/HO-1信号通路,降低阿司匹林诱导的胃黏膜细胞的氧化应激,从而修复胃黏膜损伤。