电针调控脂肪组织AMPK/Sirt1通路和Nrg4含量对中老年肥胖大鼠白色脂肪棕色化的影响

摘要

目的:探讨电针通过调控腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(Sirt1)通路及神经调节蛋白4(Nrg4)的含量促进高脂诱导的中老年肥胖大鼠白色脂肪棕色化的机制。方法:24只10月龄SD雄性大鼠,随机分为空白组、模型组和电针组,每组8只,以高脂饲料喂养6周建立肥胖模型。电针组电针“关元”和双侧“肾俞“”天枢”和“丰隆”(2 Hz/15 Hz,1.5 mA),留针20 min,每日1次,治疗5 d休息2 d,共治疗6周。每周测量大鼠体质量和摄食量。针刺6周末,计算大鼠Lee’s指数,称量附睾脂肪、肾周脂肪和棕色脂肪质量;ELISA法检测各组大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、去甲肾上腺素(NE)含量;HE染色观察各组大鼠白色和棕色脂肪组织形态变化;荧光定量PCR法检测大鼠脂肪组织线粒体解偶联蛋白1(UCP1)、过氧化物酶体增殖物活化受体γ辅助激活因子-1α(PGC-1α)、PR结构域蛋白16(PRDM16)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、Nrg4 mRNA的表达;Western blot法检测大鼠脂肪组织Nrg4、AMPKα、Sirt1、白介素-6(IL-6)蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠体质量与摄食量,Lee’s指数,附睾脂肪和肾周脂肪质量均明显增加(P<0.01,P<0.05,P<0.001),血清TG、TC、LDL-C含量,白色脂肪与棕色脂肪中IL-6蛋白表达明显升高(P<0.01,P<0.05);棕色脂肪质量,血清HDL-C、NE含量,白色脂肪与棕色脂肪UCP1、PGC-1α、PRDM16、PPARγ、Nrg4mRNA表达,AMPKα、Sirt1、Nrg4蛋白表达均明显降低(P<0.01,P<0.05);HE染色下白色脂肪和棕色脂肪体积增大,细胞内空泡含量增多,细胞排列紊乱,边界不清晰。与模型组比较,电针组大鼠以上指标均有所逆转(P<0.05,P<0.01,P<0.001),HE染色下白色脂肪和棕色脂肪体积减小,细胞内空泡含量减少,且细胞排列整齐,边界清晰。结论:电针可以改善中老年肥胖大鼠脂质代谢,促进白色脂肪棕色化,其机制可能与激活AMPK/Sirt1通路和上调Nrg4含量相关。