细胞外囊泡协同递送维替泊芬/TRAIL诱导口腔鳞癌细胞凋亡及增殖抑制实验研究

摘要

目的制备细胞外囊泡(EVs)共载体系,以协同递送肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)/维替泊芬(VPF)组合用于诱导口腔鳞癌细胞凋亡及增殖抑制。方法通过超速离心、过滤法分离纯化TRAIL/VPF共载EVs(MSCT-EVs/VPF)。通过BCA法检测CD63、CD9和TRAIL表达,确认EVs来源。用高效液相法检测VPF载药量,绘制体外释放曲线。使用MTT法检测细胞毒性和半数抑制浓度(IC50)。通过流式细胞仪检测细胞凋亡,最后Western blot被用于检测MSCT-EVs/VPF对SCC25细胞中凋亡相关蛋白和YAP表达的影响。结果MSCT-EVs/VPF颗粒圆整,分散性良好,直径约为100 nm;纳米体系载药量为(15.43±0.44)%,在10 h内释放57.8%的VPF,45 h释放约82.5%;MSCT-EVs和VPF均可抑制SCC25肿瘤细胞生长,呈剂量依赖性,MSCT-EVs和VPF的质量比(wt%)在10∶1~5∶1的比例范围内显示出最佳抑制效果;在100∶5~100∶15(wt%)比例下,MSCT-EVs/VPF的半抑制浓度(IC50)低于游离MSCT-EVs+游离VPF组(P<0.05),显示出更高效的抑制作用。MSCT-EVs/VPF对鳞癌细胞的高效抑制作用部分源自对Caspase-3、Bax、Bcl-2、mTOR、p-mTOR和YAP的调控。结论通过EVs递送固定比例的TRAIL/VPF,对口腔鳞癌细胞展现出高效抑制作用,为多药耐药肿瘤的治疗提供了新思路。