小檗碱靶向结合VEGFR2抑制血管生成作用的研究

摘要

目的 探讨小檗碱对肿瘤血管生成的影响及相关机制.方法 使用Discovery Studio 2017R2反向筛选小檗碱潜在的靶点;分子对接实验、SPR实验、酶活性实验和Westernblot实验评价小檗碱与靶点之间的相互作用;MTT实验和迁移抑制实验评价小檗碱对EA.hy926细胞增殖、迁移的影响;鸡胚绒毛尿囊膜实验评价小檗碱对血管生成的抑制作用.结果 反向筛选和分子对接实验结果显示小檗碱与VEGFR2有良好的结合作用,这一结果通过SPR实验和酶活实验进一步证实;MTT实验、迁移抑制实验和鸡胚绒毛尿囊膜实验显示小檗碱能够显著抑制EA.hy926细胞增殖、迁移,并能够减少鸡胚绒毛尿囊膜表面的血管生成;此外,Western blot实验显示小檗碱能够通过抑制VEGFR2的活性进而阻断VEGFR2介导的Akt/mTOR/P70S6K信号通路的激活.结论 小檗碱能够结合并抑制VEGFR2的活性,阻断其介导的Akt/mTOR/P70S6K信号通路的激活,进而发挥抗肿瘤血管生成作用,具备成为抗肿瘤血管生成药物先导化合物的条件.