人工改造野生大豆GsDREB2基因对植物耐盐和耐渗透胁迫能力的影响

摘要

DREB (dehydration responsive element binding protein)转录因子是一个干旱应答元件的结合蛋白,它能特异结合启动子中含有DRE/CRT顺式元件,激活逆境诱导基因的表达,调控植物对于旱、低温、高盐、高温等胁迫的耐逆性.大量研究表明DREB转录因子在信号传导、作用机理及基因表达方面存在复杂性.为了野生大豆来源GsDREB2基因能更有效地发挥功能,人工突变该基因的负向调节结构域(negative regulatory domain,NRD,140～204),经改造命名为GsDREB2-m NRD.在酵母中比较全长基因(FLDREB2)和GsDREB2-m NRD转录激活和与DRE元件结合的能力,并验证GsDREB2-mNRD核定位情况.分别将FLDREB2和GsDREB2-mNRD转化拟南芥,通过拟南芥幼苗期盐胁迫和渗透胁迫试验,比较GsDREB2-mNRD和FLDREB2在提高植物耐盐和渗透胁迫方面的差异.结果表明,GsDREB2基因内部存在着负向调节结构域(NRD),抑制了GsDREB2转录激活功能和DRE元件结合的特性;经改造的GsDREB2基因依然能定位在细胞核;超量表达GsDREB2-m NRD基因的拟南芥耐盐和渗透胁迫能力明显强于非转基因对照,也高于FLDREB2基因超表达的拟南芥;野生大豆来源的GsDREB2基因NRD结构域的缺失可增强该基因在植物耐盐、渗透胁迫等逆境胁迫下的功能.