贝氏莫尼茨绦虫成节及孕节间7个差异基因EST的克隆及序列分析

摘要

本研究以新疆绵羊体内寄生的贝氏莫尼茨绦虫为研究材料,运用mRNA差异显示方法,研究了贝氏莫尼茨绦虫成节和孕节节片间差异基因信息.提取贝氏莫尼茨绦虫成虫成节和孕节的总RNA为模板,以3条Oligo-dT(I,Ⅱ,Ⅲ)锚定引物和8条随机引物配对的24种组合,进行DDRT-PCR扩增.经过8%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后以及银染方法,显示差异DNA条带.凝胶回收差异条带并进行再扩增,琼脂糖电泳检测,得到7个差异片段,经克隆测序及相似性比对,其中有6条均未见有报道,所以其应为新基因.seq16与猪肉绦虫幼虫UNAM-cd2 mRNA同源性达100%,UNAM-cd2 mRNA功能未知,与细粒棘球绦虫胃蛋白酶同源性达100%,与日本血吸虫G-10蛋白同源性达88%,G-10蛋白功能未知,与黑腹果蝇胚胎生殖腺同源性84%.