乙肝病毒核心蛋白病毒样颗粒表面抗原密度对抗体应答水平的影响

摘要

[目的]为了探究乙肝病毒核心蛋白(Hepatitis B virus core protein,HBc)病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)表面抗原密度对免疫后抗体应答水平的影响,制备了不同抗原密度的HBc VLPs疫苗,并检测了其在小鼠体内的抗体应答水平.[方法]首先制备了N端带有3个甘氨酸的人巨细胞病毒重组抗原域AD-4作为模式抗原,接着通过Sortase A的介导将AD-4连接到HBc VLPs表面上.将系列浓度梯度AD-4抗原在Sortase A介导下分别与相同浓度的HBc VLPs发生反应,制备不同抗原密度的HBc-AD-4 VLPs.将其分别免疫6-8周龄BALB/c小鼠3次,每次免疫间隔2w,间接ELISA法检测被免疫小鼠血清的抗体应答水平.[结果]结果表明,当HBc VLPs表面抗原密度为44.4％时,即HBc反应浓度∶AD-4反应浓度为1∶0.5时,不足以引起高滴度的抗体产生;当HBc VLPs表面抗原密度为64.2％时,即HBc反应浓度∶AD-4反应浓度为1∶1时,HBc-AD-4 VLPs诱导的AD-4特异性抗体滴度与100％抗原密度的HBc-AD-4 VLPs所引起的抗体滴度相当;当HBc VLPs表面抗原密度大于64.2％时,引起的抗体应答水平不因抗原密度增加而进一步增强.[结论]发现了HBc VLPs表面抗原密度与免疫后抗体滴度呈正相关,然而免疫64.2％抗原密度的HBc VLPs所产生的抗体滴度可达峰值,抗原密度进一步增加,抗体应答水平不会进一步加强.