苏云金芽孢杆菌分子伴侣串联基因p19-p29的克隆和表达载体的构建

摘要

根据已知序列设计一对PCR引物(ORF-5S,ORF-3N),可从cry2Aa或cry2Ac操纵子中扩增出包含串联分子伴侣基因p19-p29的DNA片段,预期大小分别为1.6kb和2.0kb.对150株苏云金芽孢杆菌菌株进行PCR检测,从26株中获得了大小为1.6kb的扩增片段,但未获得2.0kb的片段.这表明cry2Aa型操纵子p19-p29基因存在较广泛,而cry2Ac型较罕见.将来自Y2菌株的1.6kb片段回收,通过一系列亚克隆,最终构建成一个含有p19-p29串联基因的Bt表达载体,为进一步研究p19-p29串联基因的功能奠定了基础.