瑞氏木霉内切葡聚糖酶基因在工业啤酒酵母中的整合和表达

摘要

用PCR合成的瑞氏木霉(T.reesei)β-内切葡聚糖酶Ⅰ(EGⅠ)的cDNA, 构建了由酵母醇脱氢酶 (ADH1)启动子和终止子引导表达、β-内切葡聚糖酶自身信号肽序列引导分泌、由酵母rDNA序列引导同源整合的酵母YIP型β-内切葡聚糖酶表达分泌质粒pA15-PET.采用pA15-PET与酵母YEP型G418抗性表达质粒的共转化,将EGⅠ表达单元整合到已整合有α-乙酰乳酸脱羧酶(α-ALDC)表达单元的啤酒酵母工程菌BE9711的染色体rDNA序列中,获得同时表达胞内α-ALDC和胞外β-内切葡聚糖酶的啤酒酵母工程菌.