假单胞菌WBC-3甲基对硫磷水解酶性质的初步研究

摘要

从最近分离到的有机磷农药降解菌Pseudomonas sp. WBC-3中获得了甲基对硫磷水解酶(Methyl parathion hydrolase, MPH,EC 3.1.8.3).该酶在48h的培养物中分布比例分别为:上清液2.1%, 胞内86.2%和胞间质11.7%,说明MPH为胞内酶.经过CM-sepharose Fast Flow阳离子交换层析,获得电泳纯的酶.SDS-PAGE和凝胶过滤层析表明,该酶为单体蛋白,分子量约为34kD.动力学分析显示该酶为非特异性有机磷降解酶,但最适底物为甲基对硫磷.在pH9～12范围,酶表现较高活力水平,最高活力的反应温度为40℃.根据各类金属离子和鳌合剂对酶活的影响,推测MPH为金属酶.