海南近海30株抗B16细胞活性放线菌的16S rDNA多样性分析

摘要

从海南近海,包括文昌红树林、海口红树林以及洋浦港等地采集样品,经苯酚、SDS、加热等预处理,稀释涂布麦芽汁-酵母膏琼脂(YE)、淀粉酪素琼脂(SC)、葡萄糖天冬氨酸琼脂(GA), 或者直接将样品稀释涂布加有重铬酸钾的高氏一号琼脂(Gause)和麦芽汁-酵母膏琼脂等进行平板分离.共获得354株放线菌,其中有76株具有不同程度的抗B16细胞毒活性.比较发现加热预处理法和重铬酸钾选择培养法对于广泛分离筛选抗肿瘤活性放线菌不失为一种快速、简便、行之有效的方法.YE、Gause培养基无论在分离到的放线菌总数,还是细胞毒活性菌株的比例上都显示了良好的效果.对30株具有较强抗B16细胞活性的链霉菌进行了扩增性16S rDNA限制性酶切片段多样性分析(16S ARDRA), 表明这30株链霉菌之间有较大的基因差异性.050642、060386和060524等3株菌序列分析进一步证明这3株菌属于链霉菌属,其中菌株050642与其亲缘关系最近的Streptomyces cattleya的相似性仅为95%,因此可能是一个新种.