绿灰霉素生物合成途径中3-羟基吡啶甲酸起始结构单元的活化特异性

摘要

【目的】鉴定sgvS是绿灰霉素生物合成起始结构单元3-羟基吡啶甲酸的必需基因;测定绿灰霉素起始结构单元3-羟基吡啶甲酸的活化特异性。【方法】构建sgvS的基因失活突变株和反式回补菌株,对其发酵产物进行HPLC分析。并在突变菌株sgvS的发酵液中分别添加3-羟基吡啶甲酸,吡啶-2-甲酸,3-氯-吡啶-2-甲酸,4-氯-吡啶-2-甲酸,3,5-二氯-吡啶-2-甲酸,烟酸,2-氟-烟酸,2-氯-烟酸,5-氟-烟酸,6-氟-烟酸和环哌啶-2-甲酸,用HPLC分析其代谢产物的变化。【结果】突变菌株sgvS丧失了绿灰霉素的生产能力,sgvS基因反式回补突变株恢复了绿灰霉素的生产能力。向突变菌株sgvS中添加3-羟基吡啶甲酸也能恢复绿灰霉素的生产,但添加其它上述衍生物均无法恢复绿灰霉素的生产或介导产生新的结构类似物。【结论】sgvS是绿灰霉素及其骨架起始单元3-羟基吡啶甲酸生物合成的必需基因,SgvD1对3-羟基吡啶甲酸结构单元的激活存在着严格的底物选择特异性。