Rab20在结直肠癌中高表达并调控结直肠肿瘤细胞的增殖与干性

摘要

目的探究Ras蛋白家族成员Rab20对结直肠肿瘤细胞增殖及干性的影响。方法应用TIMER2和GEPIA2数据库分析Rab20在人结直肠肿瘤组织及正常组织中的表达;采用Western blot方法检测人正常肠上皮细胞与结直肠癌细胞系XhCRC、SW620中Rab20的表达水平;应用TCGA和STRING数据库对Rab20相关基因进行富集分析;构建敲减Rab20的XhCRC、SW620细胞;转染ts045-VSVG-GFP质粒,采用免疫荧光方法检测Rab20对结直肠癌细胞囊泡运输的影响;CCK-8和细胞球体形成实验检测Rab20敲减对结直肠癌细胞增殖及干性的影响;Western blot法检测β-catenin、Cyclin D1的表达水平。结果人结直肠癌组织及细胞系中Rab20的表达水平明显高于正常组织与细胞。Rab20相关基因富集分析表明Rab20与胞吞胞吐、囊泡运输等过程相关。敲减Rab20可明显抑制结直肠癌细胞的囊泡运输能力。敲减Rab20后,XhCRC细胞增殖及干性显著抑制,且抑制作用在加入Wnt3a蛋白后被抵消。同样在敲减Rab20组中,β-catenin、Cyclin D1蛋白表达水平显著降低,而在加入Wnt3a蛋白后其表达被逆转。结论Rab20在结直肠癌中高表达,调控结直肠癌细胞囊泡运输,并通过Wnt/β-catenin信号通路增强结直肠癌细胞的增殖与干性。