在线单柱二维液相色谱法对蛋清中三种活性蛋白的快速分离纯化

摘要

基于一种新型的强阳离子交换/疏水色谱(SCX/HIC)双功能色谱柱构建了在线单柱二维液相色谱(2DLC-1C),分离系统实现了自动控制,可在线进行样品收集、二维进样和二维色谱分离.采用SCX-HIC 2DLC-1C,在120 min内可将8种标准蛋白完全分离,并成功应用于鸡蛋清中三种活性蛋白质的分离纯化.结果表明利用在线2DLC-1C技术可在70 min内完成对鸡蛋清中溶菌酶、卵清蛋白和卵转铁蛋白三种活性蛋白的快速分离纯化,其纯度分别为95％、93％和97％.该方法减少了样品的处理步骤,对样品的污染小,纯化速度快,操作简单,易于实现自动化和放大,对活性蛋白的快速分离制备和工业化生产具有广阔的应用前景.