猪传染性胃肠炎病毒N蛋白基因的克隆及其原核表达载体的构建

摘要

以本实验室从河北分离到的TGEV毒株,采用RT-PCR技术扩增了TGEV N基因,长为1149bp,并进行亚克隆重组到pMD18-T质粒载体上,连接,转化,鉴定后得到阳性重组质粒,命名为pTN,将重组质粒插入的片段进行序列分析和比较,结果表明TGEV河北分离株N基因与国外的Purdue-115、FS772/70、TO14、96-1933株均具有较高的同源性,达95%以上.推导的氨基酸序列同源性为95%以上.并将目的基因与原核表达载体pGEX-4T-3重组,成功构建了原核表达载体pGEX-N.pGEX-N表达载体的构建,为其蛋白质的表达提供重要依据.