长筒石蒜花被片DNA的提取及ISSR体系的建立

摘要

以长筒石蒜为例,探讨了花被片DNA的提取方法.并在此基础上,确立其ISSR反应程序及体系.反应程序为:94℃预变性3min,进入38个PCR循环(94℃变性30s,58℃复性30s,72℃延伸90s),最后于72℃延伸7min.扩增反应总体积为20μL:1×Taq酶扩增缓冲液,1.5mmol/LMg2+,200μmol/LdNTP,0.5μmol/L随机引物,0.5UTaq聚合酶,DNA模板10～30ng.