窄竹叶柴胡内参基因筛选及皂苷合成关键酶基因表达分析

摘要

窄竹叶柴胡(Bupleurum marginatum var.stenophyllum)为柴胡属多年生高大型草本植物,以根入药称为藏柴胡,具有较高的药用价值。本试验采用实时荧光定量PCR技术,利用geNorm、NormFinder及BestKeeper3种不同数据分析软件,从5个常用的候选基因(Actin,α-tubulin,β-tubulin,Cyclophilin,EF-1α)筛选出可在窄竹叶柴胡不同器官稳定表达的基因作为内参基因,并利用筛选得到的内参基因分析皂苷合成关键酶基因(HMGR,IPPI,FPS,SS,β-AS)在窄竹叶柴胡不同器官的相对表达量。结果表明β-tubulin基因可作为窄竹叶柴胡不同器官稳定表达的内参基因;皂苷合成关键酶基因在窄竹叶柴胡的不同器官中表达量有显著差异,IPPI基因在种子中表达量最高,其他基因在根中的表达量均高于在其他器官中的表达量,其中HMGR,FPS,SS在侧根的表达量高于主根。因此,窄竹叶柴胡各器官皂苷合成关键酶基因的表达量不同,最适内参基因为β-tubulin基因,本研究为窄竹叶柴胡分子生物学研究提供一定依据,促进其合理开发和利用。