一氧化氮在小鼠囊胚发育和孵化中的调控作用

摘要

目的 研究一氧化氮(N0)在小鼠囊胚发育和孵化中的调控作用和机制.方法 从妊娠第2.5天雌鼠子宫角获取桑葚胚进行体外培养48 h.胚胎培养液中分别添加不同浓度N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)或硝普钠(SNP),以及L-NAME与SNP联合添加.分别于第4天和第5天统计囊胚发育率和孵化率,激光扫描共聚焦显微镜观察统计囊胚总细胞数和活化型含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(caspase 3)表达.结果 随着L-NAME和SNP浓度增加,囊胚发育率、孵化率和囊胚总细胞数显著降低.在5 mmol/L L-NAME培养液中添加10 nmol/L SNP可显著提高囊胚发育率和孵化率;但随着SNP浓度增加,囊胚发育率和孵化率显著降低.L-NAME对囊胚细胞中活化型caspase 3表达没有显著影响,而500nmoL/L以上浓度SNP可显著提高囊胚细胞中活化型caspase 3表达,促进囊胚细胞凋亡.结论 NO在小鼠囊胚发育和孵化中可发挥重要的调控作用,囊胚细胞中NO浓度过低或过高都将会影响卵裂球分裂,降低囊胚发育率和孵化率,且过高浓度NO会引起囊胚细胞凋亡.