人脐带血CD34+细胞诱导小鼠缺血肢体血管生成

摘要

目的 观察体外增殖的人脐带血CD34+细胞对缺血肢体血管生成的影响,探讨CD34+细胞与血管生成的关系.方法 采集人脐血细胞并进行CD34+细胞的提取、培养.建立小鼠左后肢缺血模型并随机分为CD34+细胞增殖组(n=5)、CD34+细胞组(n=5)和空白对照组(n=5)3组.采用DiI标记CD34+细胞示踪显像和抗人核抗原抗体(HNA)免疫组织化学方法评估人CD34+细胞向缺血区域的迁移能力,肢体温度、CD31免疫组织化学方法和转化生长因子β1 (TGF-β1)m RNA表达评估缺血肢体血流改善情况.结果 DiI标记示踪及HNA显色可见扩增的CD34+细胞出现在小鼠缺血下肢的肌肉组织中并分布在血管周围.注射液体后第14天(t=5.421,P=0.001;t=0.616,P=0.000)和第28天(t=10.780,P=0.000;t=12.123,P=0.000),CD34+细胞增殖组和CD34+细胞组的温度改变百分比均明显高于对照组.注射液体后第28天,CD34+细胞增殖组和CD34+细胞组毛细血管密度分别为592.3 ±24.6(t=26.386,P=0.000)和530.7±25.5(t=21.502,P=0.000),均明显高于对照组的219.7±19.9;CD34+细胞增殖组和CD34+细胞组的TGF-β1 mRNA表达量分别为(0.578±0.050)(t=12.376,P=0.000)和(0.504±0.080) copies(t=7.098,P=0.000),均明显高于对照组的(0.224±0.040) copies.结论 体外培养的人脐带血CD34+细胞能向缺血区富集并诱导血管生成,促进血流复通,有望成为治疗下肢缺血的有效途径.