改良消化复合植块法培养新生大鼠雪旺细胞

摘要

目的 探讨改良的单酶消化法与组织贴块法相结合的培养雪旺细胞(SCs)的方法,并与经典植块法和普通消化复合植块法进行比较.方法 取新生3～5d的SD大鼠双侧坐骨神经和臂丛神经,分别采用经典植块法、普通消化复合植块法、改良消化复合植块法培养SCs.培养7d后进行细胞消化和传代,在显微镜下计数并计算细胞总量.用S-100免疫荧光染色法检测所获细胞的纯度.结果 改良消化复合植块法培养的SCs生长增殖速度最快,可获取(1.85 ±0.13)×106个细胞;普通消化复合植块法次之,可获取(1.10±0.10) ×106个细胞;经典植块法所获SCs的生长增殖速度最慢,可获取(0.77±0.03) ×106个细胞,3种方法比较差异均有统计学意义(P＜0.01).S-100免疫荧光染色结果显示,改良消化复合植块法细胞纯度为(95.73±1.51)％,普通消化复合植块法为(84.66±2.68)％,经典植块法为(74.50±4.23)％,3种方法比较差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 改良消化复合植块法可以在短时间内获得大量高纯度的SCs,为研究周围神经修复再生奠定良好的基础.