双氯芬酸联合顺铂通过热疗抑制肺腺癌A549细胞株的协同作用

摘要

目的:探讨双氯芬酸能否增强顺铂对肺腺癌A549细胞株的热化疗作用。方法:应用MTS法测定双氯酚酸和顺铂在37°C、43°C下对A549细胞的半数致死率(IC_(50)),以此确定两药物的后续实验浓度。进一步实验分组分为对照组、顺铂组、双氯酚酸+顺铂组。用流式细胞技术检测各组细胞凋亡率;RT-PCR技术检测Bax、Bcl-2 mRNA的表达情况;蛋白免疫印迹法检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果:MTS实验结果为双氯酚酸37°C、43°C的IC_(50)分别为0.138μmol/L、0.144μmol/L,顺铂37°C、43°C的IC_(50)分别为4.702 ug/mL、3.234 ug/mL。流式细胞技术检测结果显示,对照组、顺铂组、双氯酚酸+顺铂组的细胞总凋亡率分别为(12.53±0.51)%、(24.82±3.93)%、(56.07±1.97)%,组间差异具有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR检测结果为,与对照组相比,顺铂组和双氯酚酸+顺铂组的Bax mRNA表达均上调,而Bcl-2表达均下调,组间差异具有统计学意义(P<0.05);与顺铂组相比,双氯酚酸+顺铂组的Bcl-2/Bax比值下降,差异具有统计学意义(P<0.01)。蛋白免疫印迹实验结果显示,与对照组相比,顺铂组和双氯酚酸+顺铂组Bax蛋白表达均上调,且双氯酚酸+顺铂组上调更明显;Bcl-2蛋白表达均下调,且双氯酚酸+顺铂组下调更明显。结论:双氯酚酸能增强顺铂对A549细胞的热化疗作用,促进A549细胞的凋亡。