关节腔注射依那西普治疗炎性关节炎的基础和临床研究

摘要

目的：
　　 1.了解依那西普(ETA)和英夫利西单抗(INF)对体外培养的类风湿关节炎(RA)成纤维细胞样滑膜细胞(FLS)的影响。
　　 2.评价单次膝关节腔内注射ETA对脊柱关节病(SpA)和RA导致的X线无中、重度骨破坏表现的膝关节炎的疗效和安全性.比较关节腔注射和皮下注射ETA对SpA膝关节炎的疗效差异。
　　 3.了解关节液中下列炎症相关指标与SpA和RA关节炎活动性的关系：TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10浓度、Th1/Th2比例以及高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平。了解ETA对SpA和RA关节液中上述细胞因子浓度和Th1/Th2平衡性的影响。
　　 方法：
　　 1.体外培养RA患者FLS，应用WST-8比色法检测ETA和INF对FLS增殖的影响，应用流式细胞术观察ETA和INF是否能诱导FLS凋亡。
　　 2.进行单次膝关节腔内注射ETA治疗SpA和RA膝关节炎的随机、单盲、平行、阳性药(复方倍他米松)对照的临床试验。试验对象按2：1比例随机分为2组，分别给予目标膝关节腔注射25mg ETA或2ml复方倍他米松；观察4周；60例完成试验；主要疗效指标为改良HSS(Hospitalfor Special Surgery)膝关节评分。
　　 3.对膝关节较多积液的SpA和RA患者给予膝关节腔注射(11例SpA和13例RA)或皮下注射(11例SpA)25mg ETA，同时抽吸出5ml关节液，48h后评价其临床疗效并再次行关节腔穿刺抽吸出关节液；应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测其注射前后膝关节液中上述细胞因子的浓度；应用免疫散射比浊法检测其hs-CRP水平。
　　 结果：
　　 1.不同浓度ETA和INF作用24～72小时对FLS增殖的抑制率分别在1.0～17.9％和6.2～19.8％，10μmol/L ETA和INF未能诱导FLS凋亡。
　　 2.关节腔注射ETA或复方倍他米松均可使SpA和RA膝关节炎的多数疗效指标得到改善；ETA组对改良HSS膝关节评分、患者对膝健康状况VAS和医生对膝健康状况VAS的改善率大于复方倍他米松组(P=0.0409～0.0467)；不良事件：试验组8例(19.0％)，对照组8例(44.4％)。
　　 3.膝关节腔注射与皮下注射25mg ETA相比，48小时后对SpA膝关节炎的临床疗效指标、关节液白细胞和hs-CRP的改善率无明显差异。
　　 4.SpA膝关节炎改良HSS膝关节评分与关节液中细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10的浓度(P=0.0079～0.0319，r=0.4585～0.5506)及IFN-γ/IL-4比值(P=0.0678，r=0.3964)呈正线性相关，与关节液中hs-CRP水平呈负线性相关(P=0.0013，r=-0.6528)。对于关节液中上述细胞因子和IFN-γ/IL-4比值原为较高水平的SpA患者而言，ETA对其有降低作用；但对于细胞因子和IFN-γ/IL-4比值原为较低水平的SpA患者而言，ETA对其有升高作用。
　　 5.RA膝关节炎改良HSS膝关节评分和关节液细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6和IL-10的浓度及IFN-γ/IL-4比值无相关性。ETA降低了多数RA患者膝关节液的TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6和IL-10浓度。
　　 结论：
　　 1.ETA和INF在体外可以抑制RA患者FLS的增殖。
　　 2.单次膝关节腔内注射25mg ETA对于炎性膝关节炎是一种有效、安全的治疗选择，其疗效优于2ml复方倍他米松。膝关节腔注射与皮下注射25mg ETA48小时后对SpA膝关节炎的疗效相似。
　　 3.SpA关节炎活动性越强，关节液中TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6和IL-10浓度越低，hs-CRP水平越高。ETA对SpA关节液中上述细胞因子浓度起双向调节作用。
　　 4.ETA可降低多数RA患者的关节液TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6和IL-10浓度。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略语

声明

前言

第一部分 依那西普和英夫利西单抗对类风湿关节炎成纤维细胞样滑膜细胞增殖及凋亡的影响

材料和方法

1 实验对象

2 主要试剂

3 主要仪器

4 成纤维细胞样滑膜细胞培养

5 WST-8比色法测细胞抑制率

6 流式细胞术检测细胞凋亡

结果

1 成纤维细胞样滑膜细胞培养情况

2 依那西普和英夫利西单抗对成纤维细胞样滑膜细胞增殖具有抑制作用

3 依那西普和英夫利西单抗未诱导成纤维细胞样滑膜细胞凋亡

讨论

结论

第二部分 单次膝关节腔注射依那西普治疗脊柱关节病和类风湿关节炎膝关节炎的临床试验

研究对象和方法

1 试验设计

2 研究对象

3 研究用药

4 疗效的评价

5 中止研究的标准

6 疗效预测因素分析

7 数据统计分析

结 果

1 依那西普组和复方倍他米松组组内及组间疗效评价

2 依那西普组内脊柱关节病和类风湿关节炎的疗效比较

3 依那西普组内急性和慢性关节炎的疗效比较

4 主要结果总结

讨论

1 研究设计

2 疗效

3 安全性

结论

第三部分 脊柱关节病和类风湿关节炎关节液中的细胞因子水平及依那西普对其的影响

材料和方法

1 材料

2 方法

结果

1 试验完成情况

2 临床疗效

3 关节液高敏C-反应蛋白和白细胞

4 关节液细胞因子

5 主要结果总结

讨论

1 临床疗效

2 关节液高敏C-反应蛋白和白细胞

3 关节液细胞因子

结论

参考文献

综述 关节腔注射肿瘤坏死因子α拮抗剂治疗炎性关节炎

博士在读期间发表的论文

致谢