胃癌患者术后早期多种免疫活性细胞联合过继转移治疗研究

摘要

胃癌是我国最常见的消化道恶性肿瘤，尽管手术、化疗、新辅助化疗、放疗等治疗方法不断发展，但进展期胃癌患者预后仍然欠佳，因此迫切需要开展胃癌综合治疗新策略研究。近年来生物技术的迅猛发展为此奠定了基础。目前已知过继性细胞免疫治疗(adoptive cellular immunomerapy，ACI)对免疫原性较强的实体肿瘤如黑色素瘤和肾癌等治疗效果良好，但其对胃癌等弱免疫原性肿瘤疗效尚不明确。
　　 根据肿瘤免疫编辑学说，胃癌患者机体预存免疫状态与肿瘤发病、进展、治疗及预后均密切相关.因此建立胃癌患者免疫状态检测技术平台并评估其预存免疫状态，从而将免疫指标加入胃癌疗效评价体系，对确定其术后免疫治疗方案及预后评价均有着重要的参考价值。
　　 胃癌术后早期患者创伤反应刚过，机体免疫功能受到创伤进一步打击，且身体虚弱，伤口有待愈合，尚不适合进行全身化疗。而此时体内肿瘤负荷则减到最低，应该是进行免疫细胞过继转移的最佳时机。术后早期将在体外培养的多种免疫活性细胞如自体肿瘤抗原致敏的树突状细胞(DC)、细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)和肿瘤特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)回输体内，可能拮抗体内免疫抑制因素，调动并提高机体抗肿瘤免疫功能，从而取得更为满意的疗效。因此，术后早期开展多种免疫活性细胞联合过继转移治疗具有重要意义。
　　 研究目的：建立免疫状态检测技术平台以检测胃癌患者预存免疫状态并作为疗效评价指标，构建胃癌患者手术联合免疫活性细胞过继转移治疗数据库及疗效评价体系，观察术后早期多种免疫活性细胞联合过继转移治疗对患者预后的影响，为制定新的胃癌综合治疗方案奠定基础。
　　 研究方法：1.建立流式细胞术检测包括外周血树突状细胞(DC)、调节性T细胞(Treg)、记忆性T细胞、自然杀伤细胞(NK)、自然杀伤T细胞(NKT)、辅助性T淋巴细胞(Th1/Th2)、细胞毒性T淋巴细胞(Tc1/Tc2)以及代表免疫细胞功能的细胞内细胞因子(IFN-γ，及IL-4)在内的胃癌患者免疫状态检测技术平台；2.检测25例解放军总医院普通外科2008年10月21日至2008年12月5日新入院术前胃癌患者及25例正常健康献血者外周血样本，对胃癌患者预存免疫状态进行初步研究；3.建立胃癌患者综合治疗数据库及疗效评价平台，并对综合治疗后胃癌患者随访，开展术后早期多种免疫活性细胞联合过继转移治疗回顾性研究。
　　 研究结果：1.胃癌患者预存免疫状态检测结果示：胃癌患者外周血调节性T细胞较正常对照组显著增多；胃癌患者外周血Th1及Tc1亚群较正常对照组明显减少，并出现Th1/Th2及Tc1/Tc2漂移呈Th2及Tc2优势现象；胃癌患者外周血记忆性T细胞CD4+TCM、CDM+TEM、CD8+TCM亚群均较正常对照组明显升高，但是在外周主要承担杀伤性效应的CD8+TEM亚群不但不升高，反而较正常人群略有下降；胃癌患者外周血DC1、DC2及DC1/DC2较正常对照组无明显改变；胃癌患者外周血NK及NKT细胞较正常对照组无明显改变；2.共有效随访68例综合治疗后胃癌患者，COX比例风险模型多因素分析显示：患者年龄、手术类型、临床分期及术后ACI治疗为影响胃癌患者预后的独立因素(P<0.05)。单因素Kaplan-Meier模型分析及Log-Rank检验结果显示患者年龄、手术类型、临床分期及术后早期ACI治疗(手术后14天内)是影响胃癌患者术后预后的相关因素(P<0.05)，而患者性别、病理类型、术后化疗、术后ACI治疗次数对患者预后没有显著性影响(P>0.05)。
　　 研究结论：1.流式细胞术检测胃癌患者免疫状态技术平台方法稳定，临床应用性良好；2.胃癌患者预存免疫状态较正常人明显低下，评估患者预存免疫状态并将免疫指标加入胃癌疗效评价体系对确定其治疗方案及疗效评价有着重要意义；3.患者年龄、手术类型，临床分期及术后ACI治疗为影响胃癌患者预后的独立因素，较晚的发病年龄(>50岁)、施行根治性手术、较早的临床分期及术后早期ACI治疗(手术后14天内)可延长术后胃癌患者生存期，而患者性别、病理类型、术后化疗、术后ACI治疗次数对患者预后没有显著性影响。本项研究表明，术后早期免疫活性细胞过继转移治疗可延长胃癌患者手术后生存期，为提高胃癌患者综合治疗水平开创了新的前景。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略词表

声明

第一部分 术前胃癌患者预存免疫状态初步研究

前言

一、建立胃癌患者免疫状态检测平台

(一)、实验原理

(二)、主要试剂

(三)、主要仪器设备

(四)、主要试剂的配制

(五)、实验方法

二、术前胃癌患者预存免疫状态检测及分析

(一)、研究对象

(二)、预存免疫状态检测

(三)、统计学处理

(四)、结果

三、讨论

参考文献

第二部分 胃癌患者术后早期多种免疫活性细胞联合过继转移治疗研究

前 言

一、建立消化道肿瘤患者综合治疗数据库及疗效评价平台

二、利用数据库平台，进行术后早期过继免疫治疗的疗效分析

1.患者一般资料

2.多因素统计分析

3.单因素统计分析

4.讨论

5.结论

参考文献

小 结

附录一：文献综述 胃肠道恶性肿瘤过继性细胞免疫治疗进展

附录二攻读学位期间撰写的学术论文

致谢