异基因造血干细胞移植前后外周血NK细胞1-磷酸鞘氨醇受体5表达的变化与急性移植物抗宿主病发生的关系

摘要

目的：研究异基因造血干细胞移植（allogeneic hematopoietic stem cell transplantation，allo-HSCT）前后外周血NK细胞1-磷酸鞘氨醇受体5（sphingosine-1-phosphate receptor 5，S1PR5）表达的变化，探讨S1PR5表达量变化与急性移植物抗宿主病（acute graft-versus-host disease，aGVHD）发生的关系。
　　 方法：（1）密度梯度离心法分离17例动员前供者及相应移植后1个月患者外周血单个核细胞；（2）采用miniMACS磁珠分选系统分离纯化allo-HSCT供者及移植后1个月患者外周血NK细胞，流式细胞术检测分选后CD56+CD3NK细胞纯度：（3）微量RNA提取试剂盒提取NK细胞总RNA；（4）采用逆转录试剂盒将NK细胞RNA逆转录成cDNA；（5）通过实时定量PCR技术检测allo-HSCT供者及移植后1个月患者外周血NK细胞S1PR5mRNA表达变化，并观察这种变化与患者发生aGVHD的关系。
　　 结果：（1）通过miniMACS磁珠分选系统获得17例allo-HSCT供者及患者外周血高纯度NK细胞；（2）17例患者中有10例移植后1个月外周血NK细胞S1PR5 mRNA表达较相应供者降低，7例升高；总体上看，移植前后S1PR5表达变化存在较大的个体差别，差异无统计学意义；（3）9例发生aGVHD的患者中，有7例移植后1个月外周血NK细胞S1PR5 mRNA水平较移植前下降10％以上；7例未发生aGVHD的患者中仅1例出现上述情况。
　　 结论：异基因造血干细胞移植前后外周血NK细胞S1PR5表达水平发生变化，从而可能通过改变NK细胞的体内分布影响抗aGVHD作用。本研究为深入理解移植后NK细胞重建过程、揭示aGVHD发生的新机制奠定基础，同时为造血干细胞移植后aGVHD的预防、早期干预与靶向治疗提供新的思路和方法。

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