模拟失重对大鼠背根神经节形态和GDNF的影响

摘要

目的:观察模拟失重环境下大鼠背根神经节(DRG)髓鞘形态学改变;探讨尾部悬吊模拟失重对大鼠DRG内胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的影响;比较模拟失重下雌雄性大鼠DRG髓鞘形态学及GDNF变化的性别差异。
　　方法:模拟失重对大鼠DRG髓鞘的影响及性别因素的差异:选取健康成年Sprague-Dawley大鼠160只，其中雄性80只，雌性80只，随机分为正常对照(NC)组(n=80，雄性40只，雌性40只)和尾部悬吊(HU)组(n=80，雄性40只，雌性40只)。HU组通过悬吊大鼠尾部，后肢不负重来模拟失重状态，NC组不做任何处理。4周后，通过手术摘取各组Sprague-Dawley雌雄大鼠右侧腰5背根神经节。HE染色观察各组大鼠DRG细胞的大体形态，免疫组化下观测各组大鼠DRG髓鞘的情况，电镜下观察各组大鼠DRG髓鞘的超微结构。对雌雄大鼠之间的变化进行对比。模拟失重对大鼠DRG内GDNF的影响及性别因素的差异:选取健康成年Sprague-Dawley大鼠200只，其中雄性100只，雌性100只，随机分为尾部悬吊(HU)组(n=100，雄性50只，雌性50只)和正常对照(NC)组(n=100，雄性50只，雌性50只)。按上述方法对各组大鼠进行模型建立，4周后摘取各组Sprague-Dawley大鼠右侧腰5背根神经节。甲苯氨兰染色观察各组DRG内尼氏小体变化，电镜下观察各组大鼠DRG细胞内线粒体的微观结构，免疫组化观察GDNF含量的变化，Western-blot方法检测GDNF的蛋白表达，RT-PCR检测G DNF mRNA表达情况。对比雌雄大鼠之间的变化差异。
　　结果:
　　1.HE染色结果显示，与NC组相比，HU组背根经节细胞间隙轻度增宽，部分节细胞与卫星细胞分离。髓鞘碱性蛋白(MBP)免疫组化结果显示，NC组DRG髓鞘MBP免疫组化染色及IOD值较HU组增加（雄性组P＜0.01，雌性组P＜0.001），退变的髓鞘碱性蛋白(Degen MBP)免疫组化显示， NC组DRG髓鞘Degen MBP免疫组化染色及IOD值较HU组降低（雄性组P＜0.001，雌性组P＜0.001。电镜下可见HU组髓鞘板层结构变得紊乱、松散。
　　2.甲苯氨兰染色结果显示，与NC组相比，HU组DRG内尼氏体染色浅，尼氏体变小，弥散分布。电镜下可见HU组DRG内线粒体肿大、变形。免疫组化结果显示，与NC组比较，HU组GDN F量及I OD值减少（雄性组P＜0.001，雌性组P＜0.001）。Western-blot结果显示，HU组较NC组GDNF蛋白表达减少（雄性组P＜0.001，雌性组P＜0.001）。RT-PCR结果显示，与NC组相比，HU组GDNFmRNA表达降低（雄性组P＜0.001，雌性组P＜0.01）。
　　3.性别之间具有差异。
　　结论:
　　1.模拟失重可引起大鼠DRG损伤，髓鞘发生退变性变化。
　　2.模拟失重状态下可引起大鼠DRG内尼氏小体形态发生变化，GDNF含量减少，GDNF蛋白表达及m RNA表达降低，DRG内线粒体发生损伤。
　　3.性别不同，模拟失重引起的DRG损伤程度不同。

目录

声明

摘要

前言

参考文献

第一部分：模拟失重对大鼠背根神经节髓鞘形态的影响及性别因素的差异

引言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

第二部分：模拟失重对大鼠背根神经节内GDNF的影响及性别因素的差异

引言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

文献综述 失重环境对机体机能的影响

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