白藜芦醇抑制维生素D3和尼古丁诱导大鼠血管钙化的作用及机制研究

摘要

背景:血管钙化(vascular calcification)是动脉粥样硬化、糖尿病、慢性肾病和老化的一种常见的并发症和临床特征，被认为是心血管疾病发病率和死亡率的一个重要的危险因子，并认为是预后的标志。它以动脉壁的弹性降低和血液流动受阻为特点，并可能导致心脏病发作和中风的发生。越来越多的证据表明，血管钙化类似于骨的重塑，是一种主动调节，可以预防和可逆的细胞介导的过程，包括诱导和抑制两个过程。白藜芦醇(RSV)，是在植物如葡萄、桑椹、桉树和花生等中发现的天然存在的多酚类抗氧化物。大量证据表明，白藜芦醇通过各种机制保护心血管系统，包括改善内皮功能，降低心肌缺血再灌注损伤，促进血管舒张，抗炎，抗氧化，抗增殖，抗动脉粥样硬化，抑制低密度脂蛋白修饰，抗血小板聚集，抗血栓形成和雌激素样作用等。
　　目的:研究白藜芦醇对血管钙化大鼠血流动力学的影响;研究白藜芦醇对血管钙化大鼠的血清及主动脉碱性磷酸酶(ALP)活性，血清离子钙水平，主动脉钙含量和钙沉积的影响;研究白藜芦醇对血管钙化大鼠主动脉OPN、BMP-2和Cbfα-1在mRNA和蛋白水平表达的影响。
　　方法:
　　1.32只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为4组(n=8):正常对照组（Con组）:给予等剂量生理盐水和花生油处理;钙化组(VDN组):给予维生素D3（300，000U/kg，肌注）和尼古丁(25mg/kg，溶于5ml花生油，灌胃)处理;VDN+RSV[L]组:在VDN组基础上给予白藜芦醇(25mg/kg/day)灌胃;VDN+RSV[H]组:在VDN组基础上给予白藜芦醇(50mg/kg/day)灌胃。
　　2.使用多通道生理参数仪进行血流动力学参数的检测;使用ALP活性检测试剂盒或钙浓度检测试剂盒检测血清和主动脉组织ALP活性，血清离子钙水平和主动脉钙含量;采用HE染色和Von Kossa染色检测主动脉中膜弹力纤维结构和钙盐沉积;采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测OPN、BMP-2和Cbfα-1在mRNA和蛋白水平的表达。
　　结果:
　　1.与Con组比较，VDN组LVW/BW、HR、SBP、PP、MBP和LVSP均明显升高，与VDN组比较，VDN+RSV[L]组的PP明显降低，VDN+RSV[H]组的LVW/BW、SBP、PP、MBP和LVSP均明显降低;与VDN+RSV[L]组比较，VDN+RSV[H]组SBP、PP和LVSP均明显降低。
　　2.HE和Von Kossa染色显示，与Con组比较，VDN组主动脉管壁厚度增加，中膜弹力纤维排列紊乱，广泛分布黑色银染颗粒。与VDN组比较，VDN+RSV[L]和VDN+RSV[H]组主动脉管壁厚度减小，中膜弹力纤维排列紊乱程度减轻，黑色银染颗粒减少。
　　3.与Con组比较，VDN组血清与主动脉ALP活性和主动脉钙含量均明显升高;与VDN组比较，VDN+RSV[L]和VDN+RSV[H]组血清与主动脉ALP活性和主动脉钙含量，均明显降低;与VDN+RSV[L]组比较，VDN+RSV[H]组血清与主动脉ALP活性和主动脉钙含量均明显降低。
　　4.与Con组比较，VDN组OPN、BMP-2和Cbfα-1在mRNA和蛋白表达水平均明显升高，与VDN组比较，VDN+RSV[L]和VDN+RSV[H]组OPN、BMP-2和Cbfα-1 mRNA和蛋白表达均明显降低;与VDN+RSV[L]组比较，VDN+RSV[H]组BMP-2 mRNA和OPN蛋白表达水平均明显降低。
　　结论:
　　1.白藜芦醇能够降低血管钙化大鼠血压和改善心脏功能;
　　2.白藜芦醇能够抑制维生素D3和尼古丁诱导的大鼠血管钙化。

目录

声明

英文缩略词表

摘要

前言

一、实验材料

二、实验方法

三、统计学分析

第一部分 白藜芦醇对血管钙化大鼠血流动力学的影响

实验分组

实验方法

实验结果

讨论

第二部分 白藜芦醇对血管钙化的作用及其机制研究

实验分组

实验方法

实验结果

讨论

结论

创新点及不足

参考文献

综述 白藜芦醇与心血管疾病

攻读学位期间第一作者发表文章

致谢