肌萎缩侧索硬化患者血浆和脑脊液中磷酸化神经丝蛋白重链水平的研究

摘要

目的:1.检测肌萎缩侧索硬化(amyotrophic lateral sclerosis，ALS)患者血浆和脑脊液中磷酸化神经丝蛋白重链(phosphorylated neurofilament heavy chain，pNF-H)的水平，探索pNF-H水平与ALS之间的关系，并分析ALS患者血浆和脑脊液中pNF-H水平有无相关性。2.探索ALS患者由局灶起病部位（球部或肢体）发展到球部及肢体同时受累的时间(the time from bulbar/spinal to generalization，TTG)与pNF-H水平有无相关性。
　　方法:使用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测51例散发性ALS患者，12例多系统萎缩(multiple system atrophy，MSA)患者和30例健康对照者血浆和脑脊液中pNF-H水平。
　　结果:1.ALS组，MSA组和健康对照组患者血浆中pNF-H中位水平分别为:1.41ng/ml，0.86ng/ml及0.28ng/ml，脑脊液中pNF-H中位水平分别为:1.55ng/ml，0.60ng/ml及0.37ng/ml。ALS组患者血浆中pNF-H水平明显高于MSA组(p=0.046)和健康对照组(p＜0.001);ALS组患者脑脊液中pNF-H水平亦明显高于MSA组(p=0.002)和健康对照组(p＜0.001)2.使用ROC曲线，ALS组患者血浆和脑脊液中pNF-H水平的曲线下面积分别为:0.874和0.876。在血浆中，选取0.685ng/ml为临界值时，pNF-H的敏感度为80.39％，特异度为73.81％;在脑脊液中，选取0.589ng/ml为临界值时，pNF-H的敏感度为82.35％，特异度为73.81％。3.血浆和脑脊液中pNF-H水平在性别之间无明显差异(血浆:p=0.750;脑脊液:p=0.429)。血浆中pNF-H水平在不同起病部位之间无明显差异(p=0.437)，脑脊液中pNF-H水平在球部起病的患者中高于肢体起病者(p=0.038)。血浆中pNF-H水平与ALS疾病严重程度，即ALS功能评分(ALSFRS-r)无明显相关性(p=0.213)，脑脊液中pNF-H水平与ALS疾病严重程度，即ALS功能评分(ALSFRS-r)呈负相关关系(r=-0.347，p=0.013)。血浆和脑脊液中的pNF-H水平均与ALS疾病进展速度呈正相关关系（血浆:r=0.535，p＜0.001;脑脊液:r=0.617，p＜0.001）。4.在ALS组中，同一患者，其血浆和脑脊液中的pNF-H水平呈明显的正相关关系(r=0.712，p＜0.001);而MSA组(p=0.417)和健康对照组(p=0.616)并未观察到这种相关性。5.本组ALS患者在随访期间均由局灶起病部位（球部或肢体）发展到全身受累。平均发展时间约为22.9±2.5个月。其中球部起病者的平均发展时间约为6.75±2.1个月，肢体起病者的平均发展时间则为25.86±2.7个月，球部起病者的发展时间明显短于肢体起病者(p＜0.001)。并观察到脑脊液(r=-0.869;p＜0.001)和血浆(r=-0.661;p＜0.001)中pNF-H水平均与TTG呈负相关关系，即TTG越短者，其脑脊液或/和血浆中的pNF-H水平越高。
　　结论:1.血浆和脑脊液中的pNF-H水平可协助临床工作中ALS的诊断与鉴别诊断。脑脊液中pNF-H水平可较好的反映疾病的严重程度。血浆和脑脊液中pNF-H水平可较好的预测疾病的进展速度。2.TTG可作为判断预后的早期指标。

目录

声明

英文缩略词表

摘要

前言

1．材料与方法

1．1 临床资料

1．1．1 研究对象

1．1．2 样本的采集

1．1．3 试验试剂与耗材

1．1．4 试验仪器

1．2 试验方法

1．2．1 样本的处理

1．2．2 ELISA检测

1．2．3 “Hook效应”

1．3 统计学分析

2．结果

2．1 ALS患者血浆和脑脊液中pNF-H水平明显升高

2．2 同一ALS患者血浆和脑脊液中pNF-H水平呈良好的正相关性

2．3 TTG和ALS患者血浆／脑脊液中pNF-H水平存在良好的正相关性

3．讨论

4．小结

参考文献

综述：肌萎缩侧索硬化的生物学标志物——磷酸化神经丝蛋白重链的研究进展

攻读学位期间发表论文

致谢