人囊胚线粒体DNA含量与体外受精-胚胎移植结局的关系探究

摘要

背景：
　　胚胎移植结局取决于于多个方面，如内分泌和实验室的条件、患者的年龄、子宫和卵巢条件等，此外，移植的胚胎的质量也是重要原因之一。研究表明，线粒体供能不足与高龄移植失败及不明原因的胚胎停育密切相关[1，2]，因此，关于线粒体DNA(mtDNA)含量能否作为预测胚胎移植结局的标志物的问题愈加引起学者们的关注。目前，已有研究提示在早期胚胎中，mtDNA拷贝数多则往往预示着移植结局失败，而mtDNA拷贝数少则预示着移植成功[3，4]。同时，有研究指出两者并无确切相关性[5]。因此，本实验通过对人类整倍体胚胎囊胚期mtDNA的拷贝数的相对含量进行分析，以期对囊胚期线粒体DNA含量与体外受精-胚胎移植结局的关系做出进一步探索。
　　目的：
　　探究人囊胚线粒体DNA含量与体外受精-胚胎移植结局的关系。
　　方法：
　　1.构建全基因组扩增产物(whole genome amplification，WGA)样本的基因文库;
　　2.运用以二代测序(next generation sequencing，NGS)为基础的拷贝数变异测序(copy number variation sequencing，CNV-Seq)对已构建的文库进行测序;
　　3.利用RUPA极速信息分析系统对测序结果进行mtDNA拷贝数相对于常染色体DNA拷贝数的含量测定。
　　结果：
　　1.收集来自中国的77对夫妻的89个整倍体囊胚期胚胎的WGA产物，其中65对夫妻行单囊胚移植，12对夫妻行双囊胚移植。来自美国的112个行单囊胚移植的胚胎和39对行双囊胚移植的胚胎PGD/PGS测序结果。
　　2.单囊胚移植移植成功组与失败组的囊胚期mtDNA相对拷贝数无明显统计学差异(P＞0.05）。对女方年龄及胚胎等级分别进行分层后比较移植结局与囊胚期mtDNA相对拷贝数，依然无明显统计学差异(P＞0.05)。
　　3.在双囊胚移植中，未发现囊胚期mtDNA相对拷贝数高低与移植成功失败的明显对应关系。
　　结论：
　　人囊胚期胚胎mtDNA含量与移植结局无明显相关性。

目录

声明

缩略词表(Abbreviations)

摘要

前言

材料与方法

二、主要实验试剂和仪器

三、方法

1．WGA产物浓度测定

2．测序文库的构建

1．入组实验对象基本情况及测序分析结果

2．单囊胚移植

3．双囊胚移植

讨论

结论

参考文献

文献综述

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