靶器官电刺激促进大鼠周围神经再生和功能恢复

摘要

目的：
　　周围神经损伤的发病率呈逐年增加的趋势，神经损伤后的修复过程极其复杂，靶器官在修复过程中占有不可忽视的作用。为了探讨靶器官在外周神经损伤后作用，以及电刺激靶器官促进神经再生及其机制，检测再生神经数量和髓鞘成熟度，神经肌肉的运动和感觉功能的恢复，从神经肌肉形态学、功能学、行为学评价其修复周围神经损伤的效果。
　　方法：
　　1、采用坐骨神经损伤模型上，给予电刺激治疗（1h/d、100ms、500μA、2w）。观察术后8w通过腓肠肌湿重比、肌力检测、HE染色、乙酰胆碱受体染色，肌肉中成肌因子家族蛋白的表达；
　　2、在体外培养大鼠骨骼肌细胞系（L6），对骨骼肌细胞进行电刺激，检测肌细胞增殖和凋亡能力，并观察其成肌因子家族（MRFs）的变化；
　　3、坐骨神经损伤模型中，检测再生远端神经的免疫荧光染色、甲苯胺蓝染色、电镜、神经电生理、足迹步态分析，从形态学到行为学，观察再生神经修复和靶器官功能恢复的效果；
　　4、股神经损伤模型，同样给予相同的电刺激治疗方案，术后8w，通过足迹步态和逆向追踪法，检测再生神经修复和运动神经元选择性再生，以及靶器官功能恢复的效果；
　　5、观察靶器官电刺激对再生神经远端神经营养因子（NTF）的mRNA水平表达的影响并研究其作用机制。
　　结果：
　　1、大鼠坐骨神经损伤模型中，电刺激组腓肠肌湿重比和肌力检测均大于对照组；HE染色结果显示：电刺激组平均肌纤维面积大于对照组；电刺激组单位面积内乙酰胆碱受体数量更多（P<0.05;vs. Ctrl）。电刺激组成肌因子家族在肌肉中的蛋白水平和肌细胞中的mRNA水平表达均上调（P<0.05;vs. Ctrl）。电刺激有效的减缓了失神经的肌肉萎缩。
　　2、远端再生神经免疫荧光和甲苯胺蓝染色显示ES组再生神经纤维数量多于对照组；且电子显微镜结果表明，ES组的再生神经髓鞘成熟度更好（再生神经数量，轴突直径，髓鞘厚度和G值比）（P<0.05;vs. Ctrl）。电刺激促进外周神经损伤后修复再生。
　　3、股神经模型中，电刺激治疗明显增加了再生神经元的数量和运动神经元的正确投射比例（P<0.05;vs. Ctrl），坐骨神经损伤模型术后8周，复合肌肉动作电位（CMAP），神经干电位（NAP）和坐骨神经功能指数（SFI）检测的所有数据证明电刺激治疗效果显著。再生神经内神经细胞黏附因子（NCAM）和神经营养因子（NTF）在蛋白和mRNA水平表达都明显上升（P<0.05;vs. Ctrl）。
　　结论：
　　靶器官电刺激治疗外周神经损伤，减缓了失神经支配肌肉的萎缩；促进外周神经再生和运动神经元选择性再生；并有效改善神经肌肉的功能恢复，上调再生神经中神经营养因子的mRNA水平表达。

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引言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

附录A：综述: 神经肌肉电刺激治疗周围神经损伤的相关研究进展

附录B：学术论文和科研成果目录

致谢