狼疮定结合激素治疗SLE的临床协同作用及其干预PBLC凋亡的信号转导机制研究

摘要

本文总结观察中药复方狼疮定结合激素治疗系统性红斑狼疮(SLE)的临床协同作用，并探讨其干预外周血淋巴细胞(PBLC)凋亡的信号转导机制。将53例SLE患者随机分成中西结合组(33例)和西药组(20例)，前者以狼疮定结合激素口服治疗，后者单用激素治疗，均连续治疗6个月，比较观察2组疗效、激素撤减、副作用及并发症情况。将80只MRL/lpr小鼠随机分成4组(每组20只)，另选20只昆明小鼠作正常对照。正常组及模型组灌胃生理盐水，中药组灌胃狼疮定悬液，西药组灌胃强的松悬液，中西结合组中西药隔日交替灌胃，连续饲养用药12周。比较观察各组体重变化、尿蛋白水平、股骨及肾组织学、胸腺及脾指数、体外培养PBLC凋亡率、胞内Ca2+、线粒体膜电位水平(△ψmt)、Bcl-2/BaxmRNA表达、Caspase-2和Caspase-3蛋白表达水平。 研究结果：临床研究结果：中西结合组显效率(39.40％)和总有效率(90.91％)均明显高于西药组(分别为25.00％、80.00％)(P＜0.05)；激素用量显著低于西药组(P＜0.01)；高血压、高血脂、消化道溃疡、继发性感染、骨质疏松等副作用的总发生率显著低于西药组(P＜0.01)。动物实验结果：中西结合组和中药组灌胃饲养前后的△体重均明显高于模型组和西药组(p＜0.05或p＜0.01)；中药组、西药组和中西结合组尿蛋白水平明显低于模型组(p＜0.05)；正常组和中西结合组的胸腺指数和脾指数明显高于西药组和模型组(p＜0.05)；西药组骨质疏松程度及肾组织病理损害较为严重；正常组、中药组、西药组和中西结合组PBLC0h和48h凋亡率、PBLC[Ca2+]i水平均明显高于模型组(p＜0.05或p＜0.01)，线粒体膜电位水平均明显低于模型组(p＜0.05或p＜0.01)；正常组、中药组和中西结合组PBLCBcl-2/BaxmRNA的表达比率均明显低于模型组和西药组(p＜0.05或p＜0.01)；PBLC凋亡Caspase-2蛋白水平依次为：中西结合组＞西药组＞中药组＞正常组＞模型组；Caspase-3蛋白被激活的水平依次为：西药组＞中西结合组＞中药组＞正常组＞模型组。 研究结论：狼疮定结合激素治疗SLE能提高临床综合疗效，有助于激素减量，并能显著减少激素所引起的高血压、高血脂、消化道溃疡、继发性感染、骨质疏松等副作用。MRL/lpr狼疮样小鼠存在PBLC凋亡障碍和淋巴细胞增殖现象，狼疮定合用激素能有效促进PBLC凋亡水平恢复正常。狼疮定可能通过调节SLEPBLC胞内[Ca2+]i水平、线粒体跨膜电位和Bcl-2/BaxmRNA的比率，与糖皮质激素共同干预PBLC的凋亡，从而在临床治疗上起到协同作用的。

目录

文摘

英文文摘

第1章绪论

1.1前言

1.2 SLE中医药研究概况

1.2.1病因病机

1.2.2辨证分型

1.2.3治法方药

1.2.4实验研究

1.3 SLE与淋巴细胞凋亡异常研究进展

1.3.1 SLE与淋巴细胞凋亡异常

1.3.2 SLE凋亡异常与T细胞亚群

1.3.3 SLE淋巴细胞凋亡的机制

1.3.4分析与展望

第2章狼疮定结合激素治疗SLE的临床协同作用研究

2.1临床资料

2.1.1病例标准

2.1.2病例情况

2.2分组与治疗

2.2.1分组

2.2.2治疗

2.3观察项目与方法

2.3.1临床表现

2.3.2实验室指标

2.4结果

2.4.1疗效标准

2.4.2疗效比较

2.4.3激素撤减情况

2.4.4副作用及并发症

第3章 狼疮定结合激素治疗SLE对PBLC凋亡信号转导干预作用的实验研究

3.1实验材料

3.1.1药品

3.1.2实验动物

3.1.3实验试剂

3.1.4主要试剂的配制

3.1.5实验设备

3.2实验方法

3.2.1分组与用药

3.2.2一般项目与指标

3.2.3 PBLC体外培养凋亡率检测

3.2.4胞内Ca2+水平（[Ca2+]i）检测

3.2.5线粒体膜电位(△ψmt)水平检测

3.2.6 Bcl-2/Bax mRNA表达检测

3.2.7 Caspase蛋白表达检测

3.3结果

3.3.1一般检测结果

3.3.1一般检测结果3.3.1.1体重变化比较

3.3.1一般检测结果3.3.1.2尿蛋白水平比较

3.3.1一般检测结果3.3.1.3胸腺和脾指数比较

3.3.1一般检测结果3.3.1.4股骨组织学检查结果

3.3.1一般检测结果3.3.1.5肾组织学检查结果

3.3.2体外培养PBLC凋亡率比较

3.3.3胞内Ca2+水平比较

3.3.4线粒体膜电位水平(△ψmt)比较

3.3.5 Bcl-2/Bax mRNA表达比率比较

3.3.6 Caspase-2和Caspase-3蛋白表达比较

第4章讨论

4.1 SLE的中医病因病机

4.2激素与SLE的治疗

4.3狼疮定与SLE的治疗

4.4 PBLC凋亡与SLE

4.5狼疮定结合激素对PBLC凋亡信号转导的干预作用

4.5.1对PBLC凋亡率的影响

4.5.2对胞内[Ca2+]i水平的影响

4.5.3对线粒体膜电势水平的影响

4.5.4对Bcl-2/Bax mRNA表达比率的影响

4.5.5对Caspases家族蛋白表达的影响

4.5.6狼疮定结合激素治疗SLE的协同作用机制探讨

第5章结论

致谢

参考文献

作者简历

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作者联系方式

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