扶正增效方对非小细胞肺癌放射增敏的临床及基因表达谱研究

摘要

[目的]扶正增效方是张代钊教授的经验方，既往临床及实验研究证明该方具有放射增敏作用。本论文在既往研究的基础上，通过前瞻性临床研究，进一步观察其配合非小细胞肺癌放疗对近期疗效和生活质量的影响；实验通过基因芯片的方法，探讨基因水平上该方放射增敏的作用机理和作用靶点。 [方法]临床采用前瞻性、随机、平行对照的设计，将62例非小细胞肺癌患者分为观察组(扶正增效方配合放疗组)32例和对照组(单纯放疗组)30例，观察近期疗效、不良反应及生活质量情况。 实验研究建立PAa裸小鼠移植瘤模型，分为Ⅰ空白组、Ⅱ单纯放疗组、Ⅲ中药组(放射加扶正增效方组)、Ⅳ西药组(放射加甲硝唑组)。瘤体生长至平均直径约1cm时给予瘤体单次β电子线照射(空白组不照射)。照射后23h快速取瘤体，提取组织总RNA，分离mRNA，逆转录，生物素标记，采用AffymetrixHumanGenomeU1332.0Array基因芯片。扫描结果采用实时-PCR技术验证，以检测基因芯片结果的可信度。 [结果]临床试验显示治疗后观察组、对照组近期有效率(CR+PR)分别为68.75％、39.00％，观察组疗效优于对照组，P＜0.05；观察组白细胞下降情况、肺部症状、皮肤症状均优于对照组，P＜0.05；卡氏评分情况观察组明显高于对照组，P＜0.001；EORTCQLQ-C30和QLQ-LC13评定生活质量情况，两组在总体健康、疲乏、呼吸困难方面差异有显著性意义，咳嗽症状差异有极显著性意义，中药组优于对照组。 实验研究发现：单纯放疗组与空白对照组的基因表达谱显示，差异基因共有46条，其中上调34条，下调12条，登录GeneBank的有7条；差异基因主要与DNA损伤与修复、凋亡相关。中药组与单纯放疗组相比，差异基因共有857条，上调349条，下调508条。其中39条在GeneBank中登录，包括18条表达上调，21条表达下调；按照功能分为细胞周期、凋亡、信号转导、代谢等类。西药组与单纯放疗组差异基因47条，其中上调37条，下调10条，15条登录GeneBank。主要与DNA损伤与修复、凋亡、信号传导相关。中药组与西药组的基因表达谱比较：上调335条，下调410条，21条登录GeneBank，按功能分为DNA损伤与修复、凋亡、周期、信号传导和免疫相关基因。实时-PCR验证结果与芯片扫描结果一致。 [结论]临床研究结果显示扶正增效方配合放疗能够提高非小细胞肺癌放疗患者的近期有效率，与单纯放疗组相比，有显著性差异。扶正增效方能减轻放疗引起的毒副反应，改善放疗患者的症状，如白细胞下降、呼吸困难、咳嗽、吞咽困难等，改善卡氏评分状况，与单纯放疗组比较，有显著性差异；EORTCQLQ-C30和QLQ-LC13问卷结果进一步证实该方能够提高生活质量。 基因芯片的结果显示，扶正增效方可能通过抑制DNA修复，诱导凋亡，减少S期细胞，抑制原癌基因的表达，起到放射增敏的作用；与既往研究结果一致。采用实时-PCR方法验证，证实芯片结果有较高的可信度。在已知功能的基因中，扶正增效方放射增敏作用的具体靶点，与甲硝唑不同。芯片结果中大量未知基因有待于今后进一步整理和研究。

目录

英文缩略语

文献综述一放射增敏药物的中西医研究现状

文献综述二基因芯片技术在肿瘤研究及中医药研究中的应用

文献综述三放射增敏相关基因的概述

参考文献

前言

临床部分 扶正增效方配合非小细胞肺癌放疗疗效观察

实验部分 扶正增效方对肺腺癌细胞放射增敏的基因表达谱分析

讨论

结语

参考文献

致谢

个人简历

附表