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两种DNA探针杂交在检测结核杆菌中的应用研究

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目录

缩略语

前言

第一部分两种DNA探针杂交检测结核杆菌方法的建立与应用——碱性磷酸酶显色系统

1.1材料和方法

1.2实验结果

1.2.1提取DNA的定量及半定量

1.2.2PCR扩增的结果

1.2.3DNA探针的合成与标记

1.2.4生物素探针显色敏感性试验

1.2.5生物素探针杂交敏感性的测定

1.2.6两种DNA探针对结核杆菌特异性试验

1.2.7两种探针对结核分枝杆菌临床分离株的检测

1.2.8两种DNA探针对临床标本PCR产物的检测

1.2.9两种探针对临床标本提取DNA直接杂交检测

1.3讨论

第二部分两种DNA探针杂交检测结核杆菌方法的建立与应用——辣根过氧化物酶化学发光系统

2.1材料和方法

2.2结果

2.2.1DNA探针敏感性试验

2.2.2生物素寡核苷酸TB42探针杂交敏感性试验

2.2.3生物素188bp DNA探针杂交敏感性试验

2.2.4两种生物素DNA探针的特异性试验

2.2.5杂交时间对两种探针直接检测M.TB染色体DNA敏感性及特异性的影响

2.2.6两种DNA探针对临床标本PCR产物的检测临床标本的收集和PCR扩增

2.2.7两种DNA探针对临床标本提取染色体DNA的直接杂交检测

2.2.8两种DNA探针杂交检测简化方法处理的标本染色体DNA

2.3讨论

附表

参考文献

全文总结

文献综述 PCR技术与核酸探针检测结核杆菌研究的若干进展

致谢

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摘要

为建立一种敏感、特异、快速诊断结核病的方法,该研究以PCR联用探针方法作为对照,对两种类型,两种酶标的DNA探针直接杂交检测结核杆菌的方法与条件及其临床应用做了较系统的研究。

著录项

  • 作者

    杨华卫;

  • 作者单位

    北京协和医学院;

    清华大学医学部;

    中国协和医科大学;

    中国医学科学院;

  • 授予单位 北京协和医学院;清华大学医学部;中国协和医科大学;中国医学科学院;
  • 学科 临床检验与诊断学
  • 授予学位 博士
  • 导师姓名 杨树德,庄玉辉;
  • 年度 1999
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 中文
  • 中图分类 病理化学;
  • 关键词

    DNA; 结核分枝杆菌; 点杂交; 显色反应; 化学发光;

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