英文缩略词表
前言
实验材料
一.实验所用细胞
二.实验所用质粒DNA
三主要试剂药品
四.主要仪器设备
实验方法
一质粒DNA的制备
1.所用试液的配制
2.大肠杆菌DH5α感受态的制备
3.大肠杆菌DH5α的转化与培养
4.质粒DNA的扩增与提取
5.质粒DNA的纯化
6.质粒DNA的酶切分析和电泳鉴定
二.细胞培养技术
1.细胞培养用液的配制
2.细胞复苏
3.细胞传代
4.细胞冻存
三.细胞分组转染
1.细胞转染用液的配制
2.磷酸钙-DNA共沉淀物的制备
3.细胞分组转染培养
四.细胞收集与计数
1.收集细胞
2.细胞显微镜下计数
五.细胞转染效率的测定
1.所用试剂的配制
2.细胞转染效率的测定
六.细胞活化及细胞裂解液的制备
1.所用溶液的配制
2.细胞活化及细胞裂解液的制备
七.cAMP浓度的测定
1.所用试液的配制
2.3H-cAMP的纯化及其纯度控制
3.标准cAMP的倍释及标准曲线的绘制
4.结合蛋白的制备及其结合力的测定
5.cAMP的测定程序
八.结果的统计学处理及AC活性分析
实验结果
一.RGS4对阿片受体偶联的AC活性的影响
1.RGS4对μ-受体偶联的AC活性的影响
2.RGS4对δ-受体偶联的AC活性的影响
二.GAIP对阿片受体偶联的AC活性的影响
1.GAIP对μ-受体偶联的AC活性的影响
2.GAIP对δ-受体偶联的AC活性的影响
三.RGS1对阿片受体偶联的AC活性的影响
1.RGS1对μ-受体偶联的AC活性的影响
2.RGS1对δ-受体偶联的AC活性的影响
四.RGS2对阿片受体偶联的AC活性的影响
1.RGS2对μ-受体偶联的AC活性的影响
2.RGS2对δ-受体偶联的AC活性的影响
五.RGS9对阿片受体偶联的AC活性的影响
1.RGS9对μ-受体偶联的AC活性的影响
2.RGS9对δ-受体偶联的AC活性的影响
六RGS10对阿片受体偶联的AC活性的影响
1.RGS10对μ-受体偶联的AC活性的影响
2.RGS10对δ-受体偶联的AC活性的影响
七.RGS4对阿片受体突变体激活时AC活性的影响
1.RGS4对μ-δ6受体偶联的AC活性的影响
2.RGS4对δ-μ6受体偶联的AC活性的影响
八.GAIP对阿片受体突变体激活时AC活性的影响
1.GAIP对μ-δδ6受体偶联的AC活性的影响
2.GAIP对δδ-μ6受体偶联的AC活性的影响
讨论与结论
参考文献
综述Ⅰ.RGS蛋白的结构及其在G蛋白信号转导中的作用与调节
一.RGS蛋白的结构与同源关系
1.RGS domain
3.RGS-Gα复合物的晶体结构
二.RGS蛋白的GAP活性及效应机制
1.RGS蛋白与Gα亚单位的相互作用
2.RGS蛋白作用的选择性
3.RGS蛋白作用的主要原理
4.RGS蛋白的GAP活性及其动力学研究
5.RGS蛋白GAP活性的分子机制
6.RGS蛋白GAP活性的调节效应
7.RGS蛋白与Gβγ的关系
三.RGS蛋白结构与功能的调节
1.RGS蛋白合成的调节
2.RGS蛋白稳定性的调节
3.RGS蛋白及Gα亚单位的共价修饰
4.其它胞内分子对RGS蛋白的调节作用
5.RGS蛋白的膜定位及其与受体的相互作用
四.RGS蛋白与非Gα分子的作用
1.PDZ domain、PTB domain和GoLoco motif的作用
2.GGL domain和1 DEP domain的作用
3.DH domain和 PH domain的作用
4.Cysteine ring和Polybasic track
5.其它结构域的作用
五.参考文献
综述Ⅱ.阿片受体及其信号转导与耐受成瘾机制的研究
一.阿片受体特性及结构与功能的研究
1.阿片受体的生物学特性
2.阿片受体多样性研究
3.阿片受体的分离纯化
4.阿片受体的克隆
5.阿片受体的选择性配体
6.阿片受体的广泛生理效应
7.阿片受体结构与功能的关系
二.阿片受体信号转导的分子基础
1.阿片受体与G蛋白α亚单位之间的偶联作用
2.阿片受体作用的主要效应体系
三.阿片受体作用的调节与耐受成瘾的关系
1.受体下调
2.脱敏
3.受体磷酸化
4.Gs偶联的兴奋性受体的作用
5.内源性抗阿片肽的作用
四.参考文献
致谢
