人胰腺癌中DPC4/SMAD4/MADH4基因改变的检测

摘要

该研究采用该科自建的5株人胰腺癌细胞系、11例新鲜冷冻和70例石蜡包埋人胰腺癌及癌旁正常胰腺组织配对资料,应用1、PCR-SSCP银染技术及PCR产物直接测序法检测DPC4基因第1、2、3、4、8、11外显子的缺失和突变情况;2、IHC技术检测人胰腺癌中TβRII、TGFβ1、Smad4、P21<'wafl>、P16基因的蛋白表达情况;3、ISH技术检测人胰腺癌中Smad4基因mRNA表达情况;4、Westernblot分析5株人胰腺癌细胞系Smad4蛋白表达情况.以期从DNA、mRNA和蛋白水平了解DPC4/Smad4基因改变、产物表达情况及其与临床病理的关系.并探讨在TGF-β通路中TβRII、TGFβ1、Smad4、P21<'wafl>蛋白表达之间可能的相互关系,Smad4与P16基因蛋白表达的相关关系,探讨该侯补肿瘤抑制基因在胰腺癌形成发展过程的可能作用机制.结果表明:人胰腺癌纯合性缺失和突变是DPCR4/Smad4基因失活的主要机制,总改变率达40.28﹪.胰腺癌与正常胰腺相比Smad4、P21<'wafl>、P16蛋白表达明显下降,而TβRII与TGFβ1呈过表达.TβRII与TGFβ1、Smad4与P21<'wafl>、Smad4与P16之间有相关关系.Smad4在TGF-β诱导基因表达调控和随后的生长抑制中是关键的转录因子,但TGFβ有时也可能以与Smad4无关的形成起作用.

目录

英文缩略词

前言

实验材料

实验方法

结果

讨论

小结

参考文献

附图

综述一

综述二

致谢

个人简历