用“Comet”分析法检测人肿瘤细胞放射敏感性的方法学研究

摘要

目的：分析用“Comet”分析法检测离体培养的人肿瘤细胞和人癌裸小鼠移植瘤DNA放射损伤的影响因素,建立用“Comet”分析法检测人肿瘤活检细胞的放射敏感性的实验方法.材料与方法：采用人鼻咽癌、人肺腺癌细胞和人癌裸小鼠移植瘤细胞,从离体培养细胞和实体瘤水平对样品进行不同电压、裂解及电泳时间的“Comet”分析,并对影响因素进行归纳和探讨.结果：实验结果显示：（1）在裂解时间、电泳电压强度及时间三个因素中,电压强度对彗尾矩的影响相对重要.（2）离体培养细胞“Comet”分析的适宜条件为：4℃裂解40-50min,电压0.24V/cm（8V）,电泳15-20min.实体瘤细胞“Comet”分析的适宜条件为：裂解40-50min,电压0.30-0.36V/cm（10-12V）,电泳15-20min.（3）5Gy照射后,相同实验条件下,人鼻咽鳞癌细胞的彗尾矩TM值普遍大于人肺腺癌细胞,说明鳞癌细胞较腺癌细胞更为放射敏感.（4）对实体瘤进行“Comet”分析,因取材原因会有一定数量的坏死细胞混在其中,从而使对照组细胞平均彗尾矩差别较大.因而在分析实体瘤照射引起的DNA损伤时必须设置对照,以进行本底水平的校正.

目录

序言

摘要

文献综述：“Comet”分析法及应用

论文：用“Comet”分析法检测人肿瘤细胞放射敏感性的方法学研究

实验一离体培养细胞“Comet”分析法实验条件的优化

实验二实体瘤“Comet”分析法实验条件的优化

讨论

附图

参考文献

附录1主要实验仪器和试剂

附录2在读期间发表文章

致谢