藏族原发性高血压的分子遗传学研究

摘要

本次实验选取遗传背景相对单一的藏族群体为研究对象,进行了RAS系统中主要成分AGT、ACE和AT<,1>R基因的多态性和原发性高血压的关联分析.不同以往的基于单个位点的分析,我们用多位点的单体型分析和分层相结合的方法,检测与高血压可能相关的特异单体型以及探索可能存在的基因—基因之间的协同作用.为一步证实和解释遗传学的关联分析的结果,以及鉴定存在于AT<,1>R基因5'调控区的SNPs是否真正具有改变转录活性的功能,我们构建含AT<,1>R基因5'调控区序列不同长度的缺失片段和不同单体型的荧光素酶报告基因重组质粒,体外转染HeLa细胞并测定它们的瞬时表达荧光素酶活性.以期待从功能方面进一步阐明基因结构和表型之间的内在关联.本研究表明AGT基因235MM基因型可能是藏族女性高血压的危险因素.同时我们还发现AT<,1>R基因单体型和AGT基因235TT基因型协同与高血压相关,此结果提示在原发性高血压的遗传学研究中多位点的单体型分析和基因—基因相互作用的估计较单个位点的分析所具有的潜在优势.体外转录活性研究显示位于AT<,1>R基因5'调控区的SNPs参与基因的转录调控.单体型ATCCGA(-2228,-521,-214,-213,-153,1166)可能具有的保护作用这一群体遗传学分析所得的结果在随后的体外转录检测中得到了机制上的验证.含有单体型-521T\-214C\-213C\-153G的报告基因重组质粒,其活性在由SNPs-521C/T,-214A/C(-213G/C)和-153A/G组成的四个主要单体型所构成的重组质粒中活性最低.提示AT<,1>R基因启动子区的SNPs可能存在影响转录的活性的功能.