多肽抗生素apidaecin的表达、纯化和药理作用研究

摘要

存在于动物和植物的大量抗菌肽在天然免疫系统中发挥着重要的作用,因为它们都具有很好的抗菌活性,因此对于解决目前细菌耐药性问题很有帮助.本论文对来源于膜翅目昆虫的富含脯氨酸的抗菌肽apidaecin的诱导表达、表达后的纯化以及其药理作用进行了研究.我们研究了apidaecin在乳酸乳球菌和短小杆菌的表达.已经完成了apidaecin在乳酸乳球菌的表达及纯化,但是目前应用这一系统对apidaecin的表达产率较低,还不适合大规模工业生产.apidaecin在短小杆菌系统中的外泌表达正在研究之中,这一表达系统有可能提高apidaecin的表达产量及简化下游纯化程序.对apidaecin的表达纯化使其药理和毒理作用研究以及进一步应用于临床治疗成为可能.同时,对泛素蛋白水解酶YUH1的成功表达纯化解决了泛素融合蛋白的酶切问题,为表达很多具有抗菌活性或其它生物活性的小肽提供了一种较好的方法.

目录

常用英汉缩略语

前言

材料和基本方法

实验方法和结果

第一部分YUH1的克隆、表达及纯化研究

第二部分apidaecin的表达及纯化研究

第三部分apidaecin的药理作用研究

讨论

小结

参考文献

文献综述富含脯氨酸的抗菌肽研究进展

致谢

附录