RNA干扰Survivin及neu基因对卵巢癌细胞株SKOV3/DDP细胞生长、凋亡及药物敏感性的作用

摘要

目的：RNA干扰(RNAi)是由双链RNA介导的、在mRNA水平特异关闭相应基因的基因阻断新技术，在基因功能的研究方面已经展现显著功效，对于基因治疗亦具有极大的应用前景。Survivin及neu基因与卵巢癌细胞的生长、凋亡及耐药性相关。本研究旨在探讨Survivin及HER-2/neuRNAi对卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP细胞生长、凋亡及药物敏感性的作用，寻找下调基因表达并逆转化疗耐药的方法，为卵巢癌的基因治疗探索新途径。 方法：应用含有U6启动子的pSilencer1.0-U6表达载体构建Survivin及neu基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体(pSilencer-Survivin和pSilencerneu)，用脂质体方法将pSilencer-Survivin或pSilencer-neu转染卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP，另设未转染组及转染pSilencer-control组为对照。显微镜下观察转染前后细胞的变化；用RT-PCR及WesternBlot检测Survivin及neu基因mRNA及蛋白的表达；MTT法检测细胞生长情况；流式细胞仪检测细胞凋亡及周期的变化；加入顺铂后检测RNAi对SKOV3/DDP顺铂药物敏感性的影响。　　结论：应用RNAi可以部分阻抑Survivin及HER-2/neu基因在卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP中的表达，使SKOV3/DDP细胞生长减慢、凋亡增加，而且对顺铂的敏感性增强。RNAi技术有望成为肿瘤基因治疗的一种新方法。

目录

论文说明：资助

前言

材料与方法

实验结果

一 、卵巢癌细胞株SKOV3及顺铂耐药株SKOV3/DDP的相关检测

讨论

一、RNAi——一种关闭基因的新方法

实验小结

参考文献

文献综述：调亡抑制蛋白与卵巢癌化疗耐药

研究生在读期间已发表和即将发表论文及参加学术会议目录

致谢