延长氟尿苷给药时间及合用亚叶酸对大鼠体内氟尿苷及其代谢物氟尿嘧啶的药物动力学与组织分布转化的影响

摘要

北京协和医院绒癌组目前治疗滋养细胞肿瘤主要是采取FUDR连续5天持续8小时输注的化疗方案。为了进一步提高其对滋养细胞肿瘤的疗效，依据FUDR治疗其它肿瘤的临床文献报告，临床准备尝试观察采用FUDR持续120小时输注(相同剂量持续24小时输注连续5天)的化疗方案的临床疗效，是否优于原化疗方案；同时也希望考察合用亚叶酸钙(CF)是否可以增加FUDR的疗效。但由于目前还没有关于新化疗方案治疗滋养细胞肿瘤的临床研究文献参考，因此有必要先在动物体内进行研究，考察FUDR给药时间改变及合用CF后对FUDR及其代谢物5FU在大鼠体内的药物动力学特征的影响，尤其是FUDR及其代物5FU在其治疗滋养细胞肿瘤的主要靶组织(子宫组织)的分布与代谢转化的影响，为下一步临床实验提供数据支持。 本实验首先分别建立了大鼠血清中及子宫组织中FUDR和5FU的HPLC测定方法。这些方法灵敏专一，准确精密，满足下一步在大鼠体内进行FUDR及其代谢物5FU的药物动力学、组织分布及代谢转化的研究要求。在此基础上，模拟临床给药剂量及给药时间的变化，同时也考虑到动物实验的可实施性。依据随机、对照的原则，将190只雌性Wistar大鼠随机分为A、B、C、D四组，A、C两组大鼠各45只，2小时输注FUDR，对应临床持续8小时给药化疗方案；B、D两组大鼠各50只，6小时输注FUDR，对应临床持续120小时给药化疗方案；C、D两组在给予FUDR之前先给予CF。FUDR与CF分别采用静脉持续输注和静脉注射的给药方式，给药剂量依据临床用药剂量采用种间转换公式计算获得。根据药物动力学原理及文献报告的FUDR半衰期设计每组样本采集时间点，每个时间点5只大鼠，2小时输注组分9个时间点，6小时输注组分10个时间点。每只大鼠按设计好的时间，以断头的方式采集血样本，同时采集子宫组织样本。采集的样本分别采用已建立好的HPLC方法测定大鼠血清和子宫组织中FUDR及5FU浓度。对各实验组每个时间点5只大鼠的样本测定值进行汇总，并用Grubbs检验法对可疑值进行取舍后，取均值作为该点的药物浓度，绘制出药时曲线。采用Winnolin药动学软件计算出大鼠血清中FUDR和5FU及大鼠子宫组织中5FU的药物动力学参数。分别将A组、C组与B组、D组的药动学参数进行相应对比，判断FUDR给药时间由2小时延长为6小时，给药速率等比例下调后，对大鼠体内FUDR及其代谢物5FU的药物动力学参数的影响。分别将A组、B组与C组、D组的药动学参数进行相应对比，判断合用CF后对大鼠体内FUDR及其代谢物5FU的药物动力学参数的影响。把每只大鼠血清5FU与FUDR浓度转变为摩尔浓度，计算它们之间的比值，对各实验组每个时间点5只大鼠的血清5FU/FUDR的摩尔浓度比值进行汇总，并对可疑值进行取舍后，取均值，绘制出血清5FU/FUDR的摩尔浓度比随时间变化的趋势曲线。比较相应实验组大鼠血清5FU/FUDR的摩尔浓度比值随时间变化趋势间的差异，分别判断FUDR给药时间延长及合用CF对鼠血中FUDR向5FU转化的影响。计算每只大鼠子宫组织中5FU与血清中5FU的浓度比值，对各实验组每个时间点5只大鼠的子宫组织5FU/血清5FU浓度比值进行汇总，并对可疑值进行取舍后，取均值，绘制出子宫组织5FU/血清5FU浓度比随时间变化的趋势曲线。比较相应实验组大鼠子宫组织5FU/血清5FU浓度比随时间变化趋势间的差异，分别判断FUDR给药时间延长及合用CF对FUDR向子宫组织的分布转化的影响。依据本实验结果，发现大鼠尾静脉输注FUDR后，血清及子宫组织中检测出了较高浓度的5FU，但在子宫组织中基本未有FUDR检出，推测可能是由于FUDR在子宫中被迅速转化为5FU。 本研究发现，大鼠尾静脉输注FUDR时间由2小时延长为6小时，给药速率等比例下降后，对血清FUDR的药动学参数及向其代谢物5FU的分布转化没有显著影响，但使血清中FUDR的代谢物5FU的半衰期缩短。合用CF后可以增加大鼠血清中FUDR及其代谢物5FU的AUC与Cmax，降低了子宫组织中5FU的Cmax，还可以明显增高2小时输注组大鼠子宫中5FU的AUC。对CF是否能够促进FUDR的抗肿瘤效果，仍有待于进一步的临床数据加以证实。

目录

论文说明：勘误表

缩略语表

背景

第一部分大鼠血清中FUDR的HPLC测定方法的建立

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

4 小结

参考文献

第二部分大鼠血清中5FU的HPLC测定方法的建立

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

4 小结

参考文献

第三部分大鼠子宫组织中FUDR的HPLC测定方法的建立

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

4 小结

参考文献

第四部分大鼠子宫组织中5FU的HPLC测定方法的建立

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

4 结论

参考文献

第五部分输注时间延长及合用CF对FUDR及其代谢物5FU在大鼠体内的药物动力学及相互转化的影响

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

4 结论

参考文献

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致谢