重组人瘦素对慢性特发性血小板减少性紫癜（CITP）患者骨髓巨核细胞的影响

摘要

目的：ITP是一种慢性获得性自身免疫性疾病，其特点是患者体内产生抗血小板抗体，导致网状内皮系统破坏自身血小板。ITP的发病机制复杂，一般认为其发病机理主要为免疫因素导致血小板破坏过多，但血小板生成还与巨核细胞的正常凋亡密切相关，对于疾病过程中巨核细胞及其造血功能改变的研究尚不足。瘦素是一种对造血及免疫细胞发挥重要作用的因子，CITP患者血清瘦素水平升高，与血小板计数呈负相关，与血小板相关抗体IgG呈正相关，本研究旨在明确瘦素对CITP胃髓巨核细胞是否有影响。 方法：以急性巨核细胞白血病细胞株M07e和CITP骨髓CD34+细胞经诱导分化的巨核细胞为研究对象。运用RT-PCR检测MO7e细胞瘦素受体mRNA表达，运用Brdu-ELISA法检测瘦素对M07e细胞的增殖作用，运用Annexin V/PI双标流式检测瘦素对M07e细胞的凋亡作用。经TPO、SCF诱导磁珠分选后获得的CITP骨髓CD34+细胞分化为巨核细胞，运用流式测定瘦素对其分化过程中CD41a+、CD61+的表达以及CD41a+细胞的凋亡是否有影响。 结果：瘦素受体长型Ob-RL和短型Ob-RS在M07e细胞均有mRNA表达。瘦素对M07e细胞的增殖有促进作用，并呈现一定的剂量依赖性，浓度为5ng/ml即显示出促增殖效应(p=0.037)，但浓度在5、10、25ng/ml之间无明显统计学差异，浓度为100ng/ml时其增殖效应最大。在时间依赖效应上，瘦素作用48h，其细胞增殖明显高于24h，而作用72h其细胞增殖介于两者之间(p=0.000)。瘦素对M07e细胞具有抑制凋亡作用(p=0.001)，而且在作用72小时后凋亡率最高。瘦素对骨髓CD34+细胞分化为巨核细胞过程中CD41a+、CD61+表达的影响，与不加瘦素组相比无明显统计学差异(P>0.05)。对CD41a+细胞凋亡的影响与不加瘦素组相比亦无明显统计学差异(P>0.05)。 结论：瘦素通过促进MO7e细胞的增殖，抑制其凋亡来参与巨核细胞自血病的发生、发展。瘦素在TPO+SCF诱导CITP骨髓巨核细胞分化中无明显协同作用，对分化产生CD41a+巨核细胞的凋亡亦无明显作用。

目录

第一部分重组人瘦素对慢性特发性血小板减少性紫癜(CITP)患者骨髓巨核细胞的影响

摘要

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

第二部分出血分级在特发性血小板减少性紫癜患者中的临床意义

摘要

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

综述 瘦素与自身免疫病

附录

研究生在读期间发表的论文

致谢