60例多发性骨髓瘤患者细胞与分子遗传学检测及其临床意义的研究

摘要

[目的]:应用传统细胞遗传学(conventionalcytogenetics，CC)检查、常规间期荧光原位杂交技术(interphasefluorescenceinsituhybridization，i—FISH)及CD138磁珠分选富集后行i—FISH的方法检测我国多发性骨髓瘤(multiplemyeloma，MM)患者的遗传学异常并分析其临床意义。 [方法]:(1)收集患者骨髓标本，采用R显带的方法行常规染色体核型分析，计数15个分裂相。(2)经CD138磁珠分选骨髓瘤细胞后行i—FISH的方法检测了MM患者4个位点的遗传学异常：13q14(RB—1/D13S319)，14q32(IGH)，17p13(P53)以及1q21，并对有IgH重排的患者进行了t(11；14)(q13；q32)、t(4；14)(p16；q32)和t(14；16)(q32；q23)三种易位的检测。(3)同时采用分选和未分选方法行i—FISH检测了13q14(RB—1/D13S319)和14q32(IGH)2个位点的遗传学异常。 [结果]:(1)CC分析共检出10例异常核型，检出率为22.3％(10/45)；i—FISH检测发现86.7％(52/60)的患者有遗传学异常，其中RB—1缺失总体检出率为53.3％，IgH重排检出率为66.7％，包括t(11；14)19例、t(4；14)17例、t(14；16)3例，P53缺失检出率为25％，1q21扩增检出率为56.1％。 (2)CC检测、未分选i—FISH和CD138磁珠分选i—FISH三种方法△13(—13/13q—)检出率分别为8.9％、23.3％和60％，比较三组检出率发现分选后i—FISH可明显提高CC与未分选i—FISH检出率(P=0.000对P=0.008)，但CC与未分选i—FISH相比检出率尚未达统计学显著性(P=0.104)； (3)i—FISH与CC检测同时发现A13的患者中位PFS短于单纯i—FISH检测△13患者，但差异尚未达统计学显著性(0个月对7个月，P=0.064)；i—FISH检测发现RB—1缺失与IgH基因重排、P53缺失、1q21位点扩增密切相关(P=0.000对P=0.008对P=0.003)。 (4)根据i—FISH分析结果，将初治组患者按照MayoClinc标准分为低、高危两组，高危组中位PFS明显短于低危组(P=0.007)，高危组中位OS亦短于低危组，但差异尚未达统计学显著性(P=0.085)。 (5)单因素分析示初治患者中P53缺失、血β2—MG水平大于5.5mg/L、起病时骨髓涂片浆细胞比例高于30％是不良预后因素(P=0.001对P=0.03对P=0.037)。多因素分析示只有P53缺失具有独立的预后意义(P=0.019)。 (6)近期疗效分析：硼替佐米和传统化疗相比，可明显提高RB—1缺失、IgH重排及1q21扩增患者的近期疗效(疗效达PR以上)，但P53缺失患者使用硼替佐米虽可提高其近期疗效，但远期疗效仍不佳。 [结论]:(1)CD138磁珠分选后行i—FISH检测是提高MM异常检出率的有效方法。 (2)MayoClinc分组从分子遗传学角度对MM患者进行预后分层，对其预后分析有较好的指导意义。(3)单因素分析示初治患者中P53缺失、血β2—MG水平大于5.5mg/L、起病时骨髓涂片浆细胞比例高于30％是不良预后因素。(4)多因素分析示P53缺失是独立的预后因素。

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英文文摘

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实验材料与方法

结果

讨 论

参考文献

综述一多发性骨髓瘤与P53基因

综述二多发性骨髓瘤遗传学异常分析及预后意义

攻读硕士期间发表的论文

致 谢