细胞色素P11B、细胞色素P11B及促肾上腺皮质激素受体与肾上腺肿瘤

摘要

目的：
　　 检测细胞色素P11B1（CYP11B1）、细胞色素P1182（CYP1182）及促肾上腺皮质激素受体（ACTH-R）在正常肾上腺皮质、醛固酮分泌腺瘤、皮质醇分泌腺瘤和嗜铬细胞瘤中的表达水平，初步探索此三种基因与上述肾上腺皮髓质肿瘤疾病的关系。
　　 方法：
　　 1.用Trizol试剂分别提取组织的总RNA，包括：正常肾上腺组织（n=6）、嗜铬细胞瘤（n=2）、醛固酮分泌腺瘤（n=18）、皮质醇分泌腺瘤（n=11）。
　　 2.逆转录后扩增CYP11B1、CYP11B2、ACTH-R和内参GAPDH的cDNA，产物电泳后测条带灰度，计算CYP11B1/GAPDH、CYP11B2/GAPDH和ACTH-R/GAPDH灰度的比值代表以上基因的相对表达量。
　　 3.分别比较CYP11B1、CYP11B2、ACTH-R基因在不同肾上腺组织中的表达差异：分别分析CYP11B1、CYP11B2、ACTH-R基因的表达与肿瘤激素分泌水平等临床指标的关系；分析上述三种基因表达相互之间的联系。
　　 结果：
　　 1.在正常肾上腺皮质、醛固酮分泌腺瘤和皮质醇分泌腺瘤中均存在不同程度的CYP11B1、CYP11B2和ACTH-R基因的表达，在嗜铬细胞瘤中未发现以上三种基因的表达。
　　 2.醛固酮分泌腺瘤与CYP11B1、CYP11B2和ACTH-R：
　　 1）CYP11B1、CYP1182和ACTH-R在醛固酮分泌腺瘤中的表达：CYP11B1在醛固酮分泌腺瘤中的表达（0.65±0.34）低于正常肾上腺组织（0.72±0.13，P<0.01）和皮质醇分泌腺瘤（0.99±0.50，P<0.01）。CYP11B2在醛固酮分泌腺瘤中的表达（1.55±0.43）高于正常肾上腺组织（1.25±0.75，P<0.01）和皮质醇分泌腺瘤（1.24±0.52，P<0.01）。ACTH-R在醛固酮分泌腺瘤中的表达（0.62±0.27）低于正常肾上腺组织（0.98±0.36，P<0.01）和皮质醇分泌腺瘤（0.87±0.28，P<0.01）。
　　 2）CYP11B1、CYP11B2和ACTH-R与醛固酮分泌腺瘤患者临床资料的相关性：醛固酮分泌腺瘤中CYP11B1 mRNA的水平与患者血钾血钠水平、卧立位肾素活性、血管紧张素和醛固酮的水平及24h UFC无相关。ACTH-R表达阳性的醛固酮分泌瘤CYP11Bx mRNA的水平与24h UFC无相关。
　　 醛固酮分泌腺瘤伴低血钾的患者（n=8）CYP11B2 mRNA水平与患者血钾水平负相关（r-0.718，p=0.04），与立位醛固酮水平正相关（r=0.708，p=0.045），与其他临床指标无相关性。在血钾正常醛固酮分泌腺瘤中的患者中（n=10），CYP11B2mRNA水平与以上临床指标无相关性。
　　 对肾素有反应的醛固酮分泌腺瘤患者（n=3）ACTH-R表达的平均水平为0.54±0.14，明显低于无反应的醛固酮分泌腺瘤患者（n=15）（0.64±0.25 P<0.01）。ACTH-R表达阳性的患者（n=11）醛固酮分泌腺瘤ACTH-R mRNA的水平与患者立位醛固酮水平正相关（r=0.845，P<0.01），与患者血钠血钾水平、卧立位肾素活性、血管紧张素、及24h UFC水平无明显相关性。
　　 3）CYP11B1、CYP11B2和ACTH-R在醛固酮分泌腺瘤中表达的相关性：CYP11B2和ACTH-R在醛固酮分泌腺瘤中的表达呈正相关。（r：0.662，p<0.01）。CYP11B2和ACTH-R在ACTH-R表达阳性的醛固酮分泌腺瘤中的表达呈正相关（r=0.765，P<0.01）。
　　 3.皮质醇分泌腺瘤与CYP11B1、CYP11B2和ACTH-R：
　　 1）CYP11B1、CYP11B2和ACTH-R在皮质醇分泌腺瘤中的表达：CYP11B1在皮质醇分泌腺瘤中的表达（0.99±0.50）高于正常肾上腺组织（0.72±0.13，P<0.01）和醛固酮分泌腺瘤（0.65±0.34，P<0.01）。CYP11B2在皮质醇分泌腺瘤中的表达（1.24±0.52）低于正常肾上腺组织（1.25±0.75，P=0.01）和醛固酮分泌腺瘤（1.55±0.43，P<0.01）。ACTH-R在皮质醇分泌腺瘤中的表达（0.87±0.28）低于正常肾上腺组织（0.98±0.36，P<0.01）但高于醛固酮分泌腺瘤（0.62±0.27，P<0.01）。
　　 2）CYP11B1、CYP11B2和ACTH-R与皮质醇分泌腺瘤患者临床资料的相关性皮质醇分泌腺瘤中CYP11B1 mRNA的表达与24hUFC正相关（r=0.815，p=0.002），但与血F（r=0.537，p=0.068）及ACTH水平无明显相关性。
　　 皮质醇分泌腺瘤中CYP11B2 mRNA的水平与24hUFC、血F及ACTH水平无明显相关性。
　　 皮质醇分泌腺瘤ACTH-R mRNA水平与24hUFC水平负相关（r=-0.629，p=0.038），与血总皮质醇含量ACTH值无明显相关性。
　　 3）CYP11B1、CYP11B2及ACTH-R在正常肾上腺组织及皮质醇分泌腺瘤中表达的相关性：
　　 正常组织和皮质醇分泌腺瘤CYP11B1、CYP11B2、ACTH-R基因表达没有相关性。
　　 结论
　　 1.CYP11B1在皮质醇分泌腺瘤中高表达，其表达与患者24hUFC水平正相关，提示CYP11B1在皮质醇分泌腺瘤激素合成过程中可能存在重要的作用。
　　 2.CYP11B2在醛固酮分泌腺瘤中高表达，其表达与伴低钾的患者血钾水平负相关，立位醛固酮水平正相关，提示CYP11B2在醛固酮分泌腺瘤激素合成过程中可能存在重要的作用。
　　 3.ACTH-R在皮质醇分泌腺瘤中表达减少，提示ACTH在皮质醇分泌腺瘤中受到了抑制。ACTH-R在对肾素有反应的醛固酮分泌腺瘤患者中的表达明显低于无反应的患者，提示ACTH可能影响醛固酮分泌腺瘤患者对RAS系统的反应。醛固酮分泌腺瘤ACTH-R的表达与患者CYP1182的表达患者以及立位醛固酮水平正相关，提示ACTH可能通过ACTH-R影响GYP1182的水平进而调控腺瘤激素的合成。
　　 4.CYP11B1、CYP11B2和ACTH-R在嗜铬细胞瘤中的无表达提示以上基因可能与嗜铬细胞瘤的发生无关。
　　 5.经MEDLINE检索，上述结论未见国内外文献报道。

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