中国生殖器疣和子宫颈癌HPV感染型别流行病学研究

摘要

研究背景HPV（HumanPapillomavirus人乳头状瘤病毒）病毒是危害人类健康的重要感染因素之一，它是引发生殖器疣和子宫颈癌的主要病因。2003年中国疾病预防控制中心发表数据显示，生殖器疣新发病例数为154,922，发病率为12.02/10万。世界卫生组织IARC2004年发表的数据显示中国每年有45689例新发子宫颈浸润癌，占全世界子宫颈新发病例的十分之一。随着医学科技进展，已经研发出有效的针对HPV感染的基因重组疫苗(recombinantvaccine)，目前疫苗主要针对的HPV型别包括HPV16、18、6和11型。由于还没有采用标准化的、高灵敏度检测方法获得全国HPV型别分布的流行病学数据，尚不能对该疫苗推广后可能产生的预防效果做出准确的评价。
　　 研究目的：在中国不同地区开展以医院为基础的现况研究，调查具有生殖器疣、浸润性子宫颈癌(ICC)和CIN2以上的病例中HPV感染的流行情况和HPV的型别分布。
　　 材料与方法：采用分层抽样方法选择研究对象，按照地理分布将全国分为东北、华北、西北、华中、西南、华南和华东7个大区，在每个大区遴选合作医院，共选择18家医院提供确诊生殖器疣病人及其标本和19家医院提供确诊子宫颈病变病人及其组织蜡块。
　　 疣体组织标本的HPV型别判定：采用酚，氯仿方法抽提DNA，使用通用引物MY09/11，MY09/GP5+和GP5+/GP6+以及巢式PCR扩增140-bp目标DNA。电泳分离后直接测序，如果是单一感染，直接用BLAST2.0判定HPV型别；如果是多重感染，使用T-vector转化E.coli.，随机挑选五个克隆后测序，判定HPV型别。宫颈病变组织蜡块标本的HPV型别判定：用三明治切片法，第一张和最后一张蜡卷用于HE染色，中间蜡卷用于DNA提取。HE切片由病理专家组完成诊断。将经过病理确认合格的蜡卷与蛋白酶k溶液混合，70度过夜消化，以SPF10为引物扩增，用DNA酶免疫分析(DEIA)判定是否存在HPV感染，用SPF10LiPA25(versionl)试剂盒对扩增产物进行型别判断。
　　 结果：本研究获得1295例确诊的生殖器疣病人及其福尔马林固定的标本。因PCR扩增抑制或没有提取出足够量DNA，排除290例病人的标本，余下1005例病人标本符合本次实验的要求，用于本次的生殖器疣HPV感染的分析研究。生殖器疣患者的平均年龄为32岁，女性占55.3％(556/1005)多于男性的44.7%(449/1005)。1005例生殖器疣病人中HPV阳性者为891例，感染率为88.7%。在HPV阳性病例中，HPV6和HPV11分别占46.6%和42.4%，是最常见的HPV型别，其次是HPV16占11.8%;其它型别在HPV阳性病例中的比例均小于1%。891例病人中，单一型别HPV阳性率为97.2%，而多重感染比例仅为2.8%。多重感染的型别包括HPV6、11和16。HPV6、11和16型感染占全部生殖器疣HPV阳性病例的97.9%。未发现不同大区、城市和农村、不同性别和年龄组间HPV6和11型别分布存在统计学意义的差别。
　　 本次研究共获得664例ICC病人，其中鳞癌(SCC)630例、腺癌(ADC)34例，并获得CIN2/3病人569例。SCC病人HPV感染率为97.6%，ADC为85.3%，CIN2/3为98.9%。HPV16(76.7%)和HPV18(7.8%)是SCC病人中最常见的感染型别，两者合计占SCC病人的84．0%；其次是HPV31占3.2%，HPV52占2.2%，HPV58占2.2%。在不同地区间SCC病人HPV感染率差别没有统计学显著意义。但是，SCC病人中，≤49岁年龄组的HPV16感染率大于50岁年龄组(P=0.003)，而HPV52,58和39在高年龄组有更高的感染率；相反在CIN2和CIN3病人中，≤34岁和35-49岁年龄组HPV16感染率小于50岁年龄组(P=0.01)，而HPV52、58和39在低年龄组感染率更高。与SCC病人相比，CIN2/3病人有更高的HPV31、52和58感染率，而HPV16和18的感染率则低SCC病人。
　　 结论：HPV16和18是子宫颈病变病人中的最常见的型别，HPV6、11和16是生殖
　　 器疣病人中最常见的型别。提示目前的预防性疫苗能够达到很好的效果。

目录

英文缩略语与中文解释

前言

研究目标

第一部分 中国生殖器疣HPV型别分布—以医院为基础的多中心研究

材料与方法

一、研究对象选择

二、实验方法

结果

一、研究对象的人口学特征

二、生殖器疣患者HPV感染率及其型别构成

三、不同年龄组生殖器疣患者HPV感染型别构成

四、HPV单一型别感染与多重感染

五、HPV感染型别的城乡分布

六、HPV感染型别的地区构成

七、生殖器疣患者感染HPV型别累积构成

讨论

第二部分 中国子宫颈癌HPV型别分布—以医院为基础的多中心研究

材料与方法

一、研究对象选择

二、实验方法

结果

讨论

第三部分 全文总结

参考文献

附录

综述

声明

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