局麻药物在糖尿病神经病理性疼痛大鼠坐骨神经阻滞时效关系及相关机制的研究

摘要

前言:糖尿病神经病理性疼痛(Painful Diabetic Neuropathy,PDN)是最常见的一种神经病理性疼痛,也是糖尿病最常见的并发症之一。全球糖尿病患病率逐年上升,并且相比普通人群,在需要接受手术治疗的患者中,糖尿病及糖尿病神经病理性疼痛的患病率可能更高。局部麻醉已经成为治疗神经病理性疼痛的重要方法。目前不断涌现有关糖尿病患者麻醉/镇痛模式选择的基础和临床研究,但目前尚无有关糖尿病神经病理性疼痛患者接受外周神经阻滞的临床效果及其相关机制的研究。
　　 本研究将建立糖尿病神经病理性疼痛大鼠模型。建模成功35天后,对实验组和对照组大鼠左后肢施行0.5％罗哌卡因和0.5％布比卡因神经阻滞,通过行为学观察,验证糖尿病神经病理性疼痛大鼠周围神经阻滞是否产生异于健康大鼠的阻滞效应,并通过坐骨神经病理切片观察和验证在糖尿病神经病理性疼痛大鼠及健康大鼠中,周围神经阻滞持续时间与神经损伤比例是否具有相关性。
　　 方法:雄性SD大鼠30只随机分为6组(n=5):Na(i)ve组、PDN(Painful DiabeticNeuropathy,PDN)组、0.5％Ropi-PDN(Nerve Block with0.5％Ropivacaine—PainfulDiabetic Neuropathy)组、0.5％Ropi-Na(i)ve(Nerve Block with0.5％Ropivacaine-Na(i)ve)组、0.5％Bupi-PDN(Nerve Block with0.5％Bupivacaine-Painful DiabeticNeuropathy)组及0.5％Bupi-Na(i)ve(Nerve Block with0.5％Bupivacaine-Na(i)ve)组。建立PDN(Painful Diabetic Neuropathy)大鼠模型。35天后,在神经电刺激仪的引导下,对0.5％Ropi-PDN组和0.5％Ropi-Na(i)ve组大鼠左后肢坐骨神经以0.1ml,0.5％罗哌卡因(Ropivacaine)进行神经阻滞,右后肢以同样方法于坐骨神经旁注射0.1ml生理盐水(NS,Normal Saline)。同样地,在神经电刺激仪的引导下,对0.5％Bupi—PDN组和0.5％Bupi-Na(i)ve组大鼠左后肢坐骨神经以0.1ml,0.5％布比卡因(Bupivacaine)进行神经阻滞,右后肢亦在神经电刺激仪的引导下于坐骨神经旁注射0.1ml生理盐水(NS,Normal Saline)。各组大鼠施行阻滞后第2天,吸入麻醉后处死。取左、右后肢坐骨神经置于4％多聚甲醛固定液中,4℃固定48小时后石蜡包埋、切片(2μ m)、HE染色,并于200倍显微镜下观察、计数。
　　 结果:PDN模型大鼠第4日清晨随机血糖大于14mmol/L,此后随机血糖一直高于此标准；大鼠双侧后足机械痛阈值显著下降(P<0.05),表明PDN大鼠模型已成功建立。大鼠后肢坐骨神经阻滞行为学实验显示,在相同阻滞条件下,糖尿病神经病理性疼痛大鼠感觉和运动阻滞持续时间均显著长于健康大鼠；在糖尿病神经病理性疼痛大鼠和健康大鼠中,0.5％布比卡因感觉和运动阻滞持续时间均显著长于0.5％罗哌卡因。进一步的病理切片研究显示,在糖尿病神经病理性疼痛大鼠中,外周神经阻滞将导致神经损伤比例增加；而在健康大鼠中,外周神经阻滞并不能导致神经损伤比例增加。此外,在相同阻滞条件下,糖尿病神经病理性疼痛大鼠神经损伤比例显著高于健康大鼠；而以0.1ml0.5％布比卡因或以0.1ml0.5％罗哌卡因进行坐骨神经阻滞后,糖尿病神经病理性疼痛大鼠和健康大鼠神经损伤比例并无显著差异。对上述结果进行关联性分析得出,无论对于糖尿病神经病理性疼痛大鼠或是健康大鼠,坐骨神经阻滞持续时间与神经损伤比例均无相关性。
　　 结论:在糖尿病神经病理性疼痛大鼠中,外周神经阻滞将导致神经损伤比例增加；而在健康大鼠中,外周神经阻滞并不能导致神经损伤比例增加。在相同阻滞条件下,糖尿病神经病理性疼痛大鼠阻滞持续时间显著长于健康大鼠,且前者神经损伤比例亦显著高于后者。但无论在糖尿病神经病理性疼痛大鼠或健康大鼠中,神经损伤比例与阻滞持续神经均无相关性。