脂联素对骨关节炎滑膜细胞及软骨干细胞作用的研究

摘要

目的:分析脂联素受体在关节炎滑膜细胞中的表达情况，研究脂联素对滑膜细胞PGE2产生的影响及其机制;从晚期骨关节炎患者关节软骨中分离出软骨干细胞，对其“干性”进行验证;探讨脂联素对软骨干细胞成软骨能力的影响。
　　 方法:分别从基因和蛋白水平比较脂联素受体(Adipo R)在骨关节炎(OA)和类风湿性关节炎(RA)滑膜细胞中的表达差异，探讨脂联素对滑膜细胞PGE2产生的影响，并对其机制做初步的研究;采用CD146标记，流式细胞分选的方法从晚期骨关节炎关节软骨中分离出软骨干细胞，对其克隆形成能力，表面分子，成骨、成脂、成软骨能力进行检测，并和脂肪干细胞的分化能力进行对比，最后在体外诱导软骨干细胞成软骨分化时用脂联素进行干预，观察脂联素对软骨干细胞成软骨分化能力的影响。
　　 结果:脂联素受体Adipo R1和Adipo R2在OA和RA滑膜细胞中均有表达，且AdipoR1在RA滑膜细胞中的表达要明显强于OA，而Adipo R2在两种细胞间的表达无明显差异。当给予脂联素刺激时，OA和RA滑膜细胞均能产生大量PGE2，且RA滑膜细胞PGE2产生的量要明显高于OA滑膜细胞;当给予两种细胞Adipo R1基因敲除后，RA滑膜细胞和OA滑膜细胞PGE2的释放量无明显差异，当敲除Adipo R2后，RA滑膜细胞PGE2的释放量仍明显高于OA滑膜细胞。当脂联素刺激OA滑膜细胞时，可以发现PGE2合成相关基因COX-2、mPGES-1表达量上调，且非甾体抗炎药和COX-2抑制剂能够抑制脂联素诱导的OA滑膜细胞PGE2的释放。从OA关节软骨中分离出的软骨干细胞，其表面表达有与其他类型间充质干细胞相似的表面分子，有较高的克隆形成能力，并能成功的向脂肪、骨、软骨细胞进行诱导分化;和脂肪干细胞相比，软骨干细胞具有较强的成软骨能力，但成骨和成脂肪能力不如脂肪干细胞。在成软骨诱导过程中，当加有脂联素时，会减弱软骨干细胞的成软骨分化能力。
　　 结论:脂联素能促进关节炎滑膜细胞PGE2的释放，且Adipo R1在炎性反应中起着更为重要的作用。退变关节软骨中存在有软骨干细胞，且脂联素能抑制软骨干细胞的成软骨分化能力，说明脂联素除了能在成熟细胞水平促进OA的发展，还能在干细胞水平干预干细胞参与的组织修复。

目录

摘要

前言

参考文献

第一部分：脂联素对OA患者滑膜细胞作用的研究

材料和方法

结果

讨论

参考文献

第二部分：软骨干细胞的分离与鉴定

材料和方法

结果

讨论

参考文献

第三部分：脂联素对软骨干细胞成软骨分化作用的研究

材料和方法

结果

讨论

参考文献

总结

英文缩略词表

综述

致谢

个人简历

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